久久久精品免费视频,三及精品视频,激情综合专区,亚洲色福利网站

歡迎蒞臨南京沃博生物科技有限公司官方網(wǎng)站!

DNA甲基化檢測(cè)(重亞硫酸鹽處理)試劑盒

DNA甲基化檢測(cè)(重亞硫酸鹽處理)試劑盒

       DNA甲基化是一種基本的表觀(guān)遺傳學(xué)修飾,在基因表達(dá)調(diào)控、發(fā)育調(diào)節(jié)、基因組印跡等方面發(fā)揮重要作用。在DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的催化下,CpG雙核苷的胞嘧啶第5 位碳原子被選擇性地添加甲基基團(tuán)。 在人類(lèi)腫瘤中,普遍發(fā)生甲基化異常的現(xiàn)象,由于甲基化與胚胎發(fā)育、細(xì)胞周期調(diào)控相關(guān),因此DNA甲基化狀態(tài)的變化可作為疾病診斷和預(yù)后的一個(gè)有用的指示器。

       最早在1970年,重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化就被用于鑒別DNA中的胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶(5-mC)。現(xiàn)在認(rèn)為在重亞硫酸鹽處理過(guò)程中,5-甲基胞嘧啶(5-mC)和5-羥甲基胞嘧啶(5-hmC)都不會(huì)發(fā)生堿基的變化,因此這種方法不能用來(lái)區(qū)別不同的甲基化修飾。在重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化過(guò)程中,DNA首先用重亞硫酸鈉處理,在高溫和低pH條件下,將變性DNA(單鏈DNA)中的胞嘧啶轉(zhuǎn)化為胞嘧啶-重亞硫酸鹽衍生物,這個(gè)反應(yīng)是可逆的;接下來(lái)胞嘧啶-重亞硫酸鹽衍生物發(fā)生不可逆的水解脫氨基過(guò)程,形成尿嘧啶-重亞硫酸鹽衍生物。最后在高pH條件下尿嘧啶-重亞硫酸鹽衍生物脫磺酸基形成尿嘧啶。只有未甲基化的胞嘧啶在重亞硫酸鹽處理下發(fā)生堿基變化, 5-mC5-hmC仍然保持不變。轉(zhuǎn)化處理后的DNA經(jīng)PCR擴(kuò)增,尿嘧啶(U)轉(zhuǎn)變?yōu)樾叵汆奏ぃ?span>T)。重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化示意圖如下:

 

1 重亞硫酸鹽處理將未甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)化為尿嘧啶

       Active motif公司的Bisulfite Conversion Kit提供優(yōu)化的轉(zhuǎn)化試劑、簡(jiǎn)單易用的操作步驟以及陽(yáng)性對(duì)照PCR引物,簡(jiǎn)化了DNA甲基化檢測(cè)的過(guò)程。整個(gè)轉(zhuǎn)化可在1.5小時(shí)之內(nèi)完成,轉(zhuǎn)化效率高達(dá)99%。試劑盒提供轉(zhuǎn)化特異性PCR引物,可用于測(cè)序前驗(yàn)證重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化效率。陽(yáng)性對(duì)照PCR引物適用于重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化處理的人和小鼠DNA,經(jīng)PCR擴(kuò)增可得到220 bp的產(chǎn)物。

Active motif同時(shí)也提供MethylDetector?重亞硫酸鹽修飾試劑盒,該試劑盒是Active motif公司最初提供的一款DNA甲基化檢測(cè)試劑盒,原理和Bisulfite Conversion Kit一樣,但轉(zhuǎn)化時(shí)間需要5小時(shí)。

2 Bisulfite Conversion Kit 操作流程

使用Bisulfite Conversion Kit,將目的DNA用蛋白酶K處理,加入重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化試劑和DNA變性劑,在溫度循環(huán)儀中進(jìn)行快速熱變性。經(jīng)過(guò)1.5小時(shí)的DNA轉(zhuǎn)化反應(yīng),樣品加入到試劑盒里的DNA純化柱,脫鹽后洗脫DNA,可用于PCR或其他的下游實(shí)驗(yàn)。

3 陽(yáng)性對(duì)照轉(zhuǎn)化特異性PCR引物可用于特異性擴(kuò)增轉(zhuǎn)化后的人和小鼠DNA

使用Bisulfite Conversion Kit處理人(A)和小鼠(B)基因組DNA,處理(Bis)和未處理(Untr)的DNA分別用陽(yáng)性對(duì)照轉(zhuǎn)化特異性PCR引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增分析。陽(yáng)性對(duì)照PCR引物專(zhuān)門(mén)適用于經(jīng)重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化的DNA,因此會(huì)擴(kuò)增出220bp的條帶,而未處理的DNA沒(méi)有擴(kuò)增出相應(yīng)條帶。

訂購(gòu)熱線(xiàn):025-57795736     聯(lián)系電話(huà):15852927017 (微信同號(hào))
QQ:1076801270   QQ:3570688425 

 供貨商

 產(chǎn)品編號(hào)

 產(chǎn)品名稱(chēng)

 規(guī)格

Active Motif

 55016

 Bisulfite Conversion Kit

 50 rxns

Active Motif

 55001

 MethylDetector?

 50 rxns

Active Motif

 55003

 Fully Methylated Jurkat DNA

 10 μg

Active Motif

 55007

 Jurkat genomic DNA

 10 μg


日产精品AV在线一区二区三区| 亚洲bt av老师| 操欧美妇女的屄| 天天干天天爽天天臊天天| 精品日本二区| 色性AV色| 国产福利电影久久99| 放纵插b视频| ss大香蕉vip| 日韩中文字幕熟女| 人妻痴汉电车谷原希美558| 国产成人av在线播放| 特级淫片AAA毛片| 亚洲AⅤ无码一区二区三区| 91福利国产精品视频| 国产123区不卡在线观看| 国产精品日本欧美久久久| 久久综合伊人网| 日韩艹逼一区二区三区| ww久久吊起86| 中文字幕国产激情| 内射一级内射| 日本三级片一二区| 天天夜夜干精品| 国内一区二区在线视频| 91美女黄照| 日不卡在线观看一区| AV区伦理| 男人天堂岛国AV| 中文字幕,亚洲国际| 久久国产喷水综合| 久久婷婷综合一区| 在线三级求操| 青青成人在线中文字幕| 久久久久久久大香蕉视频| 精品成人一区不卡AV在线| 午夜精品福利av网| 99精品人人妻| 偷拍自拍Av在线| 欧美一区日韩二区高清| 黄色片久久久久久久黑|