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共價(jià)結(jié)合型果膠(CSP)檢測試劑盒(微量法 100T/48S)

貨號(hào) SH0503 售價(jià)(元) 1200
規(guī)格 100T/48S CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

SH0503

共價(jià)結(jié)合型果膠(CSP)檢測試劑盒(微量法 100T/48S)

100管/48樣

正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

果膠是構(gòu)成細(xì)胞初生壁和中膠層的主要成分,主要由原果膠、果膠酸甲酯和果膠酸組成。果膠中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等,是許多高等植物細(xì)胞壁中含量最豐富的多糖成分,其獨(dú)特的物理、化學(xué)性質(zhì)影響著植物源食品的口感和品質(zhì)。果膠間以Ca2+橋及其他離子鍵、氫鍵、糖苷鍵、酯鍵和苯環(huán)偶聯(lián)的方式交聯(lián),通過不同的抽提方法可以提取各種形式的果膠,如水溶性果膠(WSP)、離子結(jié)合型果膠(ISP)和共價(jià)結(jié)合果膠(CSP)。

測定原理:

利用帶有螯合劑的堿溶液提取共價(jià)結(jié)合型果膠(CSP),采用咔唑比色法測定果膠含量。果膠水解成半乳糖醛酸,在硫酸溶液中與咔唑試劑進(jìn)行縮合反應(yīng),生成物質(zhì)在530 nm處有最大吸收峰。

試劑的組成和配制:

產(chǎn)品名稱

SH0503-100T/48S

Storage

試劑一:液體

100ml

4℃

試劑二:液體

100ml

4℃

試劑三:標(biāo)準(zhǔn)液

1ml

4℃

試劑:液體

5ml

4℃

說明書

一份

需自備儀器和用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、80%乙醇、丙酮、濃硫酸(不允許快遞)、研缽和蒸餾水

樣品的前處理:

1、細(xì)胞壁的提取:取約0.3g樣本,加入1ml 80%乙醇,室溫快速勻漿,95℃水浴20min,冷卻至室溫,4000g 25℃離心10min,棄上清。沉淀加入1.5ml80%乙醇和丙酮各洗一遍(渦旋振蕩2min左右,4000g 25℃離心10min,棄上清即可),沉淀即為粗細(xì)胞壁,加入1ml試劑一(去除淀粉)浸泡15小時(shí),4000g 25℃離心10min,棄上清,將沉淀干燥,稱重得細(xì)胞壁物質(zhì)(CWM)。

2、CSP的提?。?/span>稱取烘干的CWM 3mg,加入1ml試劑二,充分勻漿(若烘干物質(zhì)質(zhì)地堅(jiān)硬,可先研碎后再加入1ml試劑二勻漿,或者用勻漿器勻漿)。8000g 4℃離心10min,取上清液待測。

 

測定步驟:

1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至530nm處,蒸餾水調(diào)零;試劑三和試劑四37℃預(yù)熱10min以上。

2、操作

試劑名稱(μl

空白管

標(biāo)準(zhǔn)管

對照管

測定管

待測樣本

 

 

50

50

試劑三

 

50

 

 

蒸餾水

50

 

50

 

試劑四

50

50

 

50

混勻

濃硫酸

400

400

400

400

混勻,95水浴5min后,冷卻至室溫,取200μl 至微量石英比色皿或96孔板中,530nm處讀取吸光值,空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、對照管和測定管吸光值分別記為A1A2A3A4。若A大于2,需將待測樣本用蒸餾水稀釋(可稀釋10倍或20倍)。空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只要做一管,每個(gè)測定管需設(shè)一個(gè)對照管。

注意事項(xiàng):

最低檢測限為50μg /g 干重

CSP含量計(jì)算

CSP含量(mg /g 干重)= (C標(biāo)準(zhǔn)×V1) ×(A4-A3)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2) ×稀釋倍數(shù)=0.05×(A4-A3)÷(A2-A1)÷W×稀釋倍數(shù)

C標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)管濃度,0.05mg/ml;V1:加入樣本體積,0.1mlV2:加入提取液體積,1ml; W:樣本干重,g。