脂氧合酶（LOX）檢測試劑盒（分光光度法50T/24S）
| 貨號 | SH0464 | 售價（元） | 744 |
| 規(guī)格 | 50T/24S | CAS號 |
- 產品簡介
- 相關產品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0464 |
脂氧合酶（LOX）檢測試劑盒（分光光度法50T/24S） |
50管/24樣 |
測定意義：
LOX廣泛存在于動植物組織中，催化不飽和脂肪酸氧化反應，導致膜脂過氧化。在生物體的生長發(fā)育、成熟衰老及逆境脅迫過程中具有重要作用。
測定原理：
LOX催化亞油酸氧化，氧化產物在280nm處有特征吸收峰；測定280nm吸光度增加速率，來計算LOX活性。
組成：
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產品名稱 |
SH0464-50T/24S |
Storage |
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試劑一：液體 |
50ml |
4℃ |
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試劑二：液體 |
50ml |
4℃ |
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試劑三：粉劑 |
1瓶 |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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自備儀器和用品：
研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計、1ml石英比色皿、可調式移液槍和蒸餾水。
粗酶液提取：
按照組織質量（g）：試劑一體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml試劑一）進行冰浴勻漿。16000g，4℃離心20min，取上清置冰上待測。
測定：
1. 分光光度計預熱30 min，調節(jié)波長到280nm，蒸餾水調零。
2. 在試劑三中加入25ml試劑二（振蕩混勻1min），在30℃水浴中預熱10 min以上。用不完的試劑4℃保存。
3. 對照管：依次在1ml石英比色皿中加入100μl樣本和900μl試劑二，30℃反應30min后，記錄A對照。
4. 測定管：依次在1ml石英比色皿中加入100μl樣本和900μl試劑三，30℃反應30min后，記錄A測定。
5. ΔA=A測定-A對照
LOX活性計算公式：
（1）按照蛋白濃度計算
活性單位定義：25℃中每毫克蛋白每分鐘催化吸光值變化0.01個單位為1個酶活單位。
LOX (U/mg prot) =ΔA×V反總÷(Cpr×V樣)÷T×100
= 33.33×ΔA÷Cpr
（2）按照樣本質量計算
活性單位定義：25℃中每克組織每分鐘催化吸光值變化0.01個單位為1個酶活單位。
LOX (U/g 鮮重) =ΔA×V反總÷(W×V樣÷V樣總)÷T×100
= 33.33×ΔA÷W
Cpr：上清液蛋白濃度，mg/ml，需另外測定，建議使用本公司BCA蛋白質含量測定試劑盒；V樣：加入反應體系中上清液體積，100μl=0.1ml；V反總：反應總體積，1ml；V樣總：上清液總體積，1ml；W：樣本質量，g；T：反應時間，30min。