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甜菜堿（Betaine）檢測試劑盒(微量法100T/96S)
| 貨號 | SH0430 | 售價(jià)（元） | 1020 |
| 規(guī)格 | 100T/96S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0430 |
甜菜堿（Betaine）檢測試劑盒(微量法100T/96S) |
100T/96S |
測定意義：
甜菜堿是一種廣泛分布于動植物及微生物體內(nèi)的季銨型水溶性生物堿，是生物體內(nèi)膽堿的氧化產(chǎn)物，可以增強(qiáng)免疫力、降血脂、抗氧化、抗腫瘤，并可作為甲基供體，參與促進(jìn)動物蛋白質(zhì)和脂肪代謝、增進(jìn)食欲、緩和應(yīng)激、調(diào)節(jié)滲透壓、穩(wěn)定維生素等多種生物作用，在化工、醫(yī)藥、食品添加劑等領(lǐng)域有較廣泛的應(yīng)用。
測定原理：
甜菜堿在強(qiáng)酸條件下和雷氏鹽發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生沉淀，沉淀用丙酮溶解形成紅色溶液，在525nm處有特征吸收峰，測定525nm處的吸光值，可計(jì)算得樣品的甜菜堿含量。
試劑組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0430-100T/96S |
Storage |
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提取液：液體 |
30ml |
4℃ |
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試劑一：粉劑 |
3瓶 |
4℃ |
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試劑二：99%乙醚 |
（自備） |
-- |
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試劑三：70%丙酮 |
（自備） |
-- |
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說明書 |
一份 |
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試劑一：粉劑×3瓶，4℃保存；臨用前根據(jù)用量配制，每瓶加20ml蒸餾水溶解，加390μl濃鹽酸調(diào)pH為1。
試劑二：99%乙醚，自備。取無水乙醚59.4ml，加入蒸餾水0.6ml，混勻。
試劑三：70%丙酮，自備。（易揮發(fā)，根據(jù)用量自備，丙酮：蒸餾水=7:3）
自備儀器和用品：
天平、離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔板、乙醚、鹽酸、丙酮和蒸餾水。
甜菜堿提?。?/span>
取烘干后過40目篩的樣品約0.02g，加0.8ml水，置于60℃提取30min，期間不斷震蕩。再加入200μl提取液，混勻后10000g，25℃，離心10min，取上清液。
測定步驟：
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至525nm，蒸餾水調(diào)零。
2、操作表
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空白管 |
測定管 |
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上清液（μl） |
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300 |
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蒸餾水（μl） |
300 |
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試劑一（μl） |
500 |
500 |
充分混勻，4℃中反應(yīng)2h，12000rpm，25℃，離心10min，棄上清
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試劑二（μl） |
500 |
500 |
混勻，12000rpm，25℃，離心10min，棄上清。置于通風(fēng)櫥使殘余乙醚自然揮發(fā)干凈
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試劑三（μl） |
300 |
300 |
震蕩使沉淀充分溶解，取200μl于96孔板，記錄標(biāo)準(zhǔn)管和測定管525nm處吸光值A測定與A空白。ΔA=A測定管-A空白管。
注意事項(xiàng)：
1、試劑一配制時(shí)pH嚴(yán)格控制為1，否則會導(dǎo)致反應(yīng)不完全，配制后4℃只能穩(wěn)定幾個(gè)小時(shí)，配制后盡快使用。
2、試劑二與試劑三對呼吸道有一定的刺激，請做好防護(hù)工作。
甜菜堿含量計(jì)算公式：
標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 0.502x + 0.0057，R2 = 0.9993；x為甜菜堿濃度（mg/ml），y為吸光值。
甜菜堿含量（mg/g 干重）=（ΔA-0.0057）÷ 0.502× V標(biāo)準(zhǔn)÷(V樣÷V樣總×W) =1.99×（ΔA-0.0057）÷W
V標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)品體積，0.3ml；V樣：反應(yīng)中樣本體積，0.3ml；V樣總：加入提取液體積，1ml；W：樣本質(zhì)量，g