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土壤幾丁質(zhì)酶檢測(cè)試劑盒（微量法100T/48S）
| 貨號(hào) | SH0370 | 售價(jià)（元） | 1560 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0370 |
土壤幾丁質(zhì)酶檢測(cè)試劑盒（微量法100T/48S） |
100T/48S |
測(cè)定意義：
幾丁質(zhì)主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動(dòng)物的外殼與軟體動(dòng)物的器官(例如烏賊的軟骨)，以及真菌類的細(xì)胞壁中，而幾丁質(zhì)酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質(zhì)水解，具有抵御真菌侵染的作用，成為抗真菌病害的研究熱點(diǎn)。
測(cè)定原理：
幾丁質(zhì)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生N-乙酰氨基葡萄糖，進(jìn)一步與對(duì)二甲氨基苯甲醛產(chǎn)生紅色化合物，在585nm處有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了幾丁質(zhì)酶的活性。
試劑組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0370-100T/48S |
Storage |
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試劑一：液體 |
10ml |
4℃ |
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試劑二：液體 |
4ml |
4℃ |
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試劑三：液體 |
65ml |
4℃避光 |
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說明書 |
一份 |
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自備儀器和用品：
天平、水浴鍋、離心機(jī)、震蕩儀、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板，甲苯、蒸餾水。
樣品處理：
新鮮土樣風(fēng)干，過30-50目篩。
測(cè)定操作表：
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對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
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土樣（g） |
0.1 |
0.1 |
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甲苯（μl） |
15 |
15 |
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混勻，25℃靜置15min |
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蒸餾水（μl） |
100 |
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試劑一（μl） |
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100 |
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混勻，37℃培養(yǎng)24h |
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蒸餾水（μl） |
200 |
200 |
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4000rpm，4℃，離心10min，取上清200μl于新的EP管中 |
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試劑二（μl） |
20 |
20 |
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混勻，沸水浴5min |
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試劑三（μl） |
600 |
600 |
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混勻，37℃顯色20min，取200μl于微量石英比色皿/96孔板中，蒸餾水調(diào)零，測(cè)定585nm處吸光值，記為A對(duì)照管和A測(cè)定管，ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。 |
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計(jì)算公式：
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=5.2714x-0.0007，R2=0.9989；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/ml），y為吸光值ΔA。
酶活性定義：37℃條件下，每克土壤每天分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1μg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個(gè)酶活性單位。
土壤幾丁質(zhì)酶活性（μg/d/g 土樣）=（ΔA +0.0007）÷5.2714×V反總÷W÷T×1000
= 598×（ΔA +0.0007）
V反總：反應(yīng)體系總體積，0.315ml；W：樣本質(zhì)量，0.1g；T：反應(yīng)時(shí)間，1d；1000：1mg/ml=1000μg/ml
b. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=2.6357x-0.0007，R2=0.9989；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μg/ml），y為吸光值ΔA。
酶活性定義：37℃條件下，每克土壤每天分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1μg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個(gè)酶活性單位。
土壤幾丁質(zhì)酶活性（μg/d/g 土樣）=（ΔA +0.0007）÷2.6357×V反總÷W÷T×1000
= 1195×（ΔA +0.0007）
V反總：反應(yīng)體系總體積，0.315ml；W：樣本質(zhì)量，0.1g；T：反應(yīng)時(shí)間，1d；1000：1mg/ml=1000μg/ml
注意事項(xiàng):
試劑一充分混勻后再使用。