土壤幾丁質(zhì)酶（S-Chitinase）檢測試劑盒（分光光度法50T/24S)

貨號	SH0369	售價（元）	816
規(guī)格	50T/24S	CAS號

貨號	名稱	規(guī)格
SH0369	土壤幾丁質(zhì)酶（S-Chitinase）檢測試劑盒（分光光度法50T/24S)	50管/24樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義：

幾丁質(zhì)主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨)，以及真菌類的細胞壁中，而幾丁質(zhì)酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質(zhì)水解，具有抵御真菌侵染的作用，成為抗真菌病害的研究熱點。

測定原理：

幾丁質(zhì)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生N-乙酰氨基葡萄糖，進一步與對二甲氨基苯甲醛產(chǎn)生紅色化合物，在585nm處有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了幾丁質(zhì)酶的活性。

試劑組成和配制：

自備儀器和用品：

天平、水浴鍋、離心機、震蕩儀、可見分光光度計、1 ml玻璃比色皿，甲苯、蒸餾水。

樣品處理：

新鮮土樣風干，過30-50目篩。

測定操作表：

	對照管	測定管
土樣（g）	0.2	0.2
甲苯（μl）	30	30
混勻，25℃靜置15min
蒸餾水（μl）	200
試劑一（μl）		200
混勻，37℃培養(yǎng)24h
蒸餾水（μl）	400	400
4000rpm，4℃，離心10min，取上清300μl于新的EP管中
試劑二（μl）	30	30
混勻，沸水浴5min
試劑三（μl）	900	900
混勻，37℃顯色20min，取1ml于1ml玻璃比色皿中，蒸餾水調(diào)零，測定585nm處吸光值，記為A對照管和A測定管，ΔA=A測定管-A對照管。

計算公式：

標準曲線：y=5.2714x-0.0007，R²=0.9989；x為標準品濃度（mg/ml），y為吸光值ΔA。

酶活性定義：37℃條件下，每克土壤每天分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1μg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活性單位。

土壤幾丁質(zhì)酶活性（μg/d/g 土樣）=（ΔA +0.0007）÷5.2714×V反總÷W÷T×1000= 598×（ΔA +0.0007）

V反總：反應體系總體積，0.63ml；W：樣本質(zhì)量，0.2g；T：反應時間，1d；1000：1mg/ml=1000μg/ml

注意事項：

試劑一充分混勻后再使用。

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