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土壤堿性磷酸酶（S-AKP/ALP）檢測(cè)試劑盒（分光光度法 50T/48S）
| 貨號(hào) | SH0357 | 售價(jià)（元） | 312 |
| 規(guī)格 | 50T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0357 |
土壤堿性磷酸酶（S-AKP/ALP）檢測(cè)試劑盒（分光光度法 50T/48S） |
50管/48樣 |
測(cè)定意義：
土壤磷酸酶是一類催化土壤有機(jī)磷化合物礦化的酶，其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性，是評(píng)價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其最適pH范圍，分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶。
測(cè)定原理：
堿性環(huán)境中，S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚和磷酸氫二鈉，通過(guò)測(cè)定酚的生成量即可計(jì)算出S-AKP/ALP活性。
試劑組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0357-50T/48S |
Storage |
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試劑一：液體 |
1瓶 |
4℃避光 |
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試劑二：粉劑 |
1瓶 |
4℃ |
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試劑三：液體 |
1瓶 |
4℃ |
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試劑四：粉劑 |
1瓶 |
4℃避光 |
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標(biāo)準(zhǔn)品：液體 |
1瓶 |
4℃ |
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說(shuō)明書 |
一份 |
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試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。用前加50ml蒸餾水充分溶解。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1152μl無(wú)水乙醇（自備），48 μl蒸餾水充分溶解。（變褐色后不能再使用）。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1瓶，0.5μmol/ml苯酚標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。
自備儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、冰、蒸餾水、無(wú)水乙醇和甲苯。
催化反應(yīng)：
稱取風(fēng)干混勻土壤約0.1g，加入50μl甲苯（自備），輕搖15min；加400μl試劑一并且搖勻后，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱，開(kāi)始計(jì)時(shí)，催化反應(yīng)24h；到時(shí)后迅速加入1ml試劑二充分混勻，以終止酶催化的反應(yīng)。8000g，25℃離心10min，取上清液置于冰上待測(cè)。
顯色反應(yīng)：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到660 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 空白管：取1ml玻璃比色皿，加入50 μl蒸餾水，100 μl試劑三，20 μl試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水830 μl，混勻后25℃靜置30 min，于660 nm測(cè)定吸光度，記為A空白管。
3. 標(biāo)準(zhǔn)管：取1ml玻璃比色皿，加入50 μl標(biāo)準(zhǔn)液，100 μl試劑三，20 μl試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水830 μl，混勻后25℃靜置30 min，于660 nm測(cè)定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
4. 測(cè)定管：取1ml玻璃比色皿，加入50 μl上清液，100 μl試劑三，20 μl試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水830 μl，混勻后25℃靜置30 min，于660 nm測(cè)定吸光度，記為A測(cè)定管。
注意事項(xiàng)：
空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
S-ALP活性計(jì)算公式：
活性單位定義：37℃中每克土壤每天釋放1μmol酚為1個(gè)酶活單位。
S-AKP/ALP（μmol/d/g土樣）=[C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)]×V總÷W÷T
= 0.725×(A測(cè)定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)÷W
C標(biāo)準(zhǔn)液：0.5μmol/ml；V總：催化體系總體積，1.45ml；W：土壤樣品質(zhì)量，g；T：催化反應(yīng)時(shí)間，24 h=1 d。