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土壤中性磷酸酶(S-NP)檢測試劑盒（微量法 100T/96S）
| 貨號(hào) | SH0356 | 售價(jià)（元） | 576 |
| 規(guī)格 | 100T/96S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0356 |
土壤中性磷酸酶(S-NP)檢測試劑盒（微量法 100T/96S） |
100T/96S |
測定意義：
土壤磷酸酶是催化土壤有機(jī)磷礦化的酶，其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性，是評(píng)價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。磷酸酶活性受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH的顯著影響，根據(jù)最適PH范圍，一般把土壤磷酸酶分為中性、酸性和堿性三種類型。
測定原理：
中性環(huán)境中，S-NP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚和磷酸氫二鈉，通過測定酚的生成量即可計(jì)算出NP活性。
試劑組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0356-100T/96S |
Storage |
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試劑一：液體 |
1瓶 |
4℃避光 |
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試劑二：粉劑 |
1瓶 |
4℃ |
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試劑三：液體 |
1瓶 |
4℃ |
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試劑四：粉劑 |
1瓶 |
4℃避光 |
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標(biāo)準(zhǔn)品：液體 |
1瓶 |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。用前加100ml蒸餾水充分溶解。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加576μl無水乙醇（自備），24μl蒸餾水充分溶解。（變褐色后不能再使用）。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1瓶，0.5 μmol/ml酚標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水、乙醇和甲苯。
催化反應(yīng)：
稱取風(fēng)干混勻土壤約0.1g，加入50μl甲苯（自備），輕搖15min；加400μl試劑一并且搖勻后，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱，開始計(jì)時(shí)，催化反應(yīng)24h；到時(shí)后迅速加入1ml試劑二充分混勻，以終止酶催化的反應(yīng)。8000g，25℃離心10min，取上清液置于冰上待測。
顯色反應(yīng)：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上，調(diào)節(jié)波長到660 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 空白管：取微量玻璃比色皿/酶標(biāo)板，加入10μl蒸餾水，20μl試劑三，4μl試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水166μl，混勻后25℃靜置30min，于660nm測定吸光度，記為A空白管。
3. 標(biāo)準(zhǔn)管：取微量玻璃比色皿/酶標(biāo)板，加入10μl標(biāo)準(zhǔn)液，20μl試劑三，4μl試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水166μl，混勻后25℃靜置30 min，于660nm測定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
4. 測定管：取微量玻璃比色皿/酶標(biāo)板，加入10μl上清液，20μl試劑三，4μl試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水166μl，混勻后室溫25℃30 min，于660nm測定吸光度，記為A測定管。
注意事項(xiàng):
空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。
使用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下
活性單位定義：37℃中每克土壤每天釋放1nmol酚為1個(gè)酶活單位。
S-NP（μmol/d/g 土樣）=[C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)]×V總÷W÷T
= 0.725×(A測定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)÷W
C標(biāo)準(zhǔn)液：0.5μmol/ml；V總：催化體系總體積，1.45ml；W：土壤樣品質(zhì)量，g；T：催化反應(yīng)時(shí)間，24 h=1 d。