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土壤谷氨酰胺酶（S-GLS）檢測(cè)試劑盒（微量法 100T/96S）
| 貨號(hào) | SH0348 | 售價(jià)（元） | 1500 |
| 規(guī)格 | 100T/96S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0348 |
土壤谷氨酰胺酶（S-GLS）檢測(cè)試劑盒（微量法 100T/96S） |
100管/96樣 |
測(cè)定意義：
GLS（EC 3.5.1.2）存在于高等動(dòng)物和某些細(xì)菌以及植物根中，催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代謝中具有重要調(diào)控作用，尤其是調(diào)節(jié)游離氨含量和尿素代謝。
測(cè)定原理：
S-GLS催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨，利用奈氏試劑檢測(cè)氨增加的速率，即可計(jì)算其酶活性。
試劑組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0348-100T/96S |
Storage |
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試劑一：液體 |
15ml |
4℃ |
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試劑二：液體 |
40ml |
4℃ |
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試劑三：液體 |
60ml |
常溫 |
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試劑四：液體 |
5ml |
常溫 |
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試劑五：液體 |
3ml |
常溫 |
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試劑六：液體 |
3ml |
常溫避光 |
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說(shuō)明書 |
一份 |
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自備儀器和用品：
臺(tái)式離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽、甲苯、冰和雙蒸水。
測(cè)定步驟：
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至420nm，蒸餾水調(diào)零。
2、樣品測(cè)定（在EP管中加入下列試劑）；
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試劑名稱（μl） |
測(cè)定管 |
對(duì)照管 |
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樣本 |
0.1 |
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甲苯 |
25 |
25 |
振蕩混勻，室溫放置15min
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試劑一 |
100 |
100 |
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試劑二 |
400 |
400 |
混勻，37℃水浴2 小時(shí)
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試劑三 |
525 |
525 |
混勻，8000 g，25℃離心10 min；取上清液，依次加入下列試劑
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上清液 |
130 |
130 |
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試劑四 |
30 |
30 |
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試劑五 |
20 |
20 |
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試劑六 |
20 |
20 |
混勻，室溫靜置15min，420nm處讀取測(cè)定管和對(duì)照管吸光值，
計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。對(duì)照管只要做一管。
注意事項(xiàng)：
試劑六如出現(xiàn)沉淀，靜置后取上清使用。
酶活性計(jì)算：
a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 3.8488x+0.0057；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/ml），y為吸光值A。
單位定義：每g土樣每min催化谷氨酰胺生成1nmol 氨定義為一個(gè)酶活力單位。
S-GLS（nmol/min/g 土樣）＝(ΔA-0.0057)÷3.8488×V反總÷W÷T=2.27×(ΔA -0.0057)÷W。
V反總：反應(yīng)體系總體積：1.05ml；T：反應(yīng)時(shí)間，2h=120min；W：樣本質(zhì)量，g; 1000，μmol到nmol換算系數(shù)。
b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 1.9244x+0.0057；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/ml），y為吸光值A。
單位定義：每g土樣每min催化谷氨酰胺生成1nmol 氨定義為一個(gè)酶活力單位。
S-GLS（nmol/min/g 土樣）＝(ΔA-0.0057)÷1.9244×V反總÷W÷T=4.55×(ΔA -0.0057)÷W。
V反總：反應(yīng)體系總體積：0.525ml；T：反應(yīng)時(shí)間，2h=120min；W：樣本質(zhì)量，g; 1000，μmol到nmol換算系數(shù)。
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