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土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)檢測試劑盒(分光光度 50T/48S)

貨號 SH0347 售價(元) 840
規(guī)格 50T/48S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0347

土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)檢測試劑盒(分光光度 50T/48S)

50管/48樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義:

GLSEC 3.5.1.2)存在于高等動物和某些細菌以及植物根中,催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨,在氮素代謝中具有重要調控作用,尤其是調節(jié)游離氨含量和尿素代謝。

測定原理:

S-GLS催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨,利用奈氏試劑檢測氨增加的速率,即可計算其酶活性。

試劑組成和配制:

產(chǎn)品名稱

SH0347-50T/48S

Storage

試劑一:液體

8ml

4℃

試劑二:液體

20ml

4℃

試劑三:液體

30ml

常溫

試劑:液體

10ml

常溫

試劑五:液體

6ml

常溫

試劑:液體

6ml

常溫避光

說明書

一份

自備儀器和用品:

臺式離心機、可見分光光度計、1ml玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽、甲苯、冰和雙蒸水。

測定步驟:

1、分光光度計預熱30min以上,調節(jié)波長至420nm,蒸餾水調零。

2、樣品測定(在EP管中加入下列試劑);

試劑名稱(μl

測定管

對照管

樣本

0.1

 

甲苯

25

25

振蕩混勻,室溫放置15min;

試劑一

100

100

試劑二

400

400

混勻,37℃水浴2 小時

試劑三

525

525

混勻,8000 g25℃離心10 min;取上清液,依次加入下列試劑

上清液

650

650

試劑四

150

150

試劑五

100

100

試劑六

100

100

混勻,室溫靜置15min,420nm處讀取測定管和對照管吸光值,

計算ΔA=A測定管-A對照管。對照管只要做一管。

注意事項:

試劑六如出現(xiàn)沉淀,靜置后取上清使用。

酶活性計算

標準條件下測定的回歸方程為y = 3.8488x +0.0057;x為標準品濃度(μmol/ml),y為吸光值A

單位定義:每g土樣每min催化谷氨酰胺生成1nmol 氨定義為一個酶活力單位。

 S-GLSnmol/min/g 土樣)=(ΔA-0.0057)÷3.8488×V反總÷W÷T×1000

=2.27×(ΔA -0.0057)÷W

V反總:反應體系總體積:1.05ml;T:反應時間,2h=120min;W:樣本質量,g; 1000μmolnmol換算系數(shù)。

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