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植物蔗糖酶檢測試劑盒(分光光度法 50T/24S)
貨號 | SH0304 | 售價(元) | 660 |
規(guī)格 | 50T/24S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
SH0304 |
植物蔗糖酶檢測試劑盒(分光光度法 50T/24S) |
50管/24樣 |
測定意義:
蔗糖酶(EC 3.2.1.26)是碳水化合物消化吸收的關(guān)鍵酶之一,能夠水解蔗糖變成相應(yīng)的單糖而被機(jī)體吸收。
測定原理:
本試劑盒采用3.5-二硝基水楊酸法測定蔗糖酶催化產(chǎn)生的還原糖的含量,由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3.5-二硝基水楊酸與還原糖共熱被還原成棕紅色的氨基化合物,在一定范圍內(nèi)還原糖的量和反應(yīng)液的顏色深度成正比。此法操作簡便、迅速、雜質(zhì)干擾較小。
組成:
產(chǎn)品名稱 |
SH0304-50T/24S |
Storage |
提取液:液體 |
60ml |
4℃ |
試劑一:液體 |
2.5ml |
4℃ |
試劑二:粉劑 |
1支 |
4℃ |
試劑三:液體 |
5ml |
常溫 |
、說明書 |
一份 |
試劑二:粉劑×1支 ,4℃保存,用時加入1.5ml蒸餾水充分溶解;用不完的試劑4℃保存;
自備儀器和用品:
可見分光光度計、沸水浴、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
樣品測定的準(zhǔn)備:
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
加樣表測定步驟:
試劑名稱(μl) |
對照管 |
測定管 |
試劑一 |
50 |
50 |
蒸餾水 |
50 |
|
樣本 |
100 |
100 |
試劑二 |
|
50 |
置于25℃準(zhǔn)確水浴10min
試劑三 |
100 |
100 |
混勻, 95℃水浴5min左右(蓋緊,防止水分散失),冷卻至室溫
蒸餾水 |
700 |
700 |
混勻,520nm蒸餾水調(diào)零,測定各管吸光值,ΔA=A測定-A對照,每個測定管設(shè)一個對照管。
蔗糖酶活力計算:
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 0.1296x -0.12;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml),y為吸光值。
2、按照蛋白濃度計算
單位定義:每mg組織蛋白每分鐘催化水解1μg蔗糖定義為一個酶活力單位。
蔗糖酶活力(μg/min/mg prot)=[1000×(ΔA+0.12)÷0.1296×V1]÷(V1×Cpr)÷T=771×(ΔA +0.12)÷Cpr。
3、按樣本鮮重計算
單位定義:每g組織每分鐘催化水解1μg蔗糖定義為一個酶活力單位。
蔗糖酶活力(μg/min/g鮮重)=[1000×(ΔA+0.12)÷0.1296×V1]÷(W×V1÷V2)÷T=771×(ΔA +0.12) ÷W。
1000:1mg/ml=1000μg/ml;V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.1ml;V2:加入提取液體積,1ml;T:反應(yīng)時間,10min; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本鮮重,g。