蔗糖合成酶（分解方向；SS-Ⅰ）檢測試劑盒（微量法100T/48S）
| 貨號 | SH0299 | 售價（元） | 1416 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號 |
- 產品簡介
- 相關產品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0299 |
蔗糖合成酶（分解方向；SS-Ⅰ）檢測試劑盒（微量法100T/48S） |
100管/48樣 |
測定意義：
蔗糖是源（葉片等）光合產物向“庫”器官運輸?shù)闹饕螒B(tài)。蔗糖合成酶（Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13）是雙向反應酶，既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解，是蔗糖代謝的關鍵酶之一。研究其分解方向SS-Ⅰ的活性對于植物蔗糖降解以及淀粉合成具有重要意義。
測定原理：
SS-Ⅰ催化蔗糖和UDP生成游離果糖和UDPG，采用3,5－二硝基水楊酸法測定還原糖的含量來反映酶活性的高低。
組成：
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產品名稱 |
SH0299-100T/48S |
Storage |
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提取液： |
100ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
10ml |
4℃ |
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試劑二：液體 |
5ml |
4℃ |
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試劑三：粉劑 |
2支 |
-20℃ |
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試劑四：液體 |
6ml |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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試劑三：粉劑×2支，-20℃保存；臨用前每支加入1.2ml試劑二充分溶解待用，現(xiàn)配現(xiàn)用；
自備儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、離心機、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰
樣品測定的準備：
按照組織質量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
測定步驟：
1、 分光光度計預熱30min以上，調節(jié)波長至540nm，蒸餾水調零。
2、 加樣表(在1.5ml棕色EP管中按下表依次加樣）：
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試劑名稱（μl） |
測定管 |
對照管 |
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樣本 |
10 |
10 |
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試劑三 |
40 |
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試劑一 |
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40 |
混勻，30℃準確水浴30min后，95℃水浴10min
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試劑四 |
50 |
50 |
95℃水浴5min左右，冷卻至室溫
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蒸餾水 |
400 |
400 |
混勻，取200μl 至微量石英比色皿或96孔板中，540nm下測定各管
吸光值。ΔA=A測定-A對照。每個測定管需要設一個對照管。
SS-Ⅰ活性計算
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1、標準條件下測定回歸方程為y = 0.0012x - 0.0492；x為標準品濃度（μg/ml），y為ΔA。
2、按照蛋白濃度計算
單位定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產生1μg 還原糖定義為一個酶活力單位。
SS-Ⅰ活性(μg /min/mg prot)= (ΔA+0.0492) ÷0.0012×V反總]÷(V樣×Cpr) ÷T
=138.9×(ΔA+0.0492) ÷Cpr
3、按照樣本鮮重計算
單位定義：每g組織每分鐘催化產生1μg 還原糖定義為一個酶活力單位。
SS-Ⅰ活性(μg /min/g鮮重) =(ΔA+0.0492) ÷0.0012×V反總]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T
=138.9×(ΔA+0.0492) ÷W
V反總：反應體系總體積，0.05ml； V樣：加入樣本體積，0.01 ml；V樣總：加入提取液體積，1 ml；T：反應時間，30 min；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/ml；W：樣本質量，g。
b.用96孔板測定的計算公式如下
1、標準條件下測定回歸方程為y = 0.0006x - 0.0492；x為標準品濃度（μg/ml），y為ΔA。
2、按照蛋白濃度計算
單位定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產生1μg 還原糖定義為一個酶活力單位。
SS-Ⅰ活性(μg /min/mg prot)= (ΔA+0.0492) ÷0.0006×V反總]÷(V樣×Cpr) ÷T
=277.8×(ΔA+0.0492) ÷Cpr
3、按照樣本鮮重計算
單位定義：每g組織每分鐘催化產生1μg 還原糖定義為一個酶活力單位。
SS-Ⅰ活性(μg /min/g鮮重) =(ΔA+0.0492) ÷0.0006×V反總]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T
=277.8×(ΔA+0.0492) ÷W
V反總：反應體系總體積，0.05ml； V樣：加入樣本體積，0.01 ml；V樣總：加入提取液體積，1 ml；T：反應時間，30 min；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/ml；W：樣本質量，g。