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直鏈淀粉檢測試劑盒(微量法 100T/96S)
貨號 | SH0286 | 售價(元) | 1440 |
規(guī)格 | 100T/96S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
SH0286 |
直鏈淀粉檢測試劑盒(微量法 100T/96S) |
100T/96S |
測定意義:
直鏈淀粉是D-葡萄糖基以a-(1,4)糖苷鍵連接的多糖鏈,其含量測定對于評價食品營養(yǎng)價值和調(diào)查植物體內(nèi)糖代謝都有重要意義。
測定原理:
利用80%乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開,直鏈淀粉與碘形成的絡(luò)合物在620nm下有吸收峰。
組成:
組分名稱 |
SH0286-100T/96S |
Storage |
試劑一:液體 |
100ml |
4℃ |
試劑二:乙醚(自備) |
100ml |
4℃ |
試劑三:液體 |
100ml |
4℃ |
試劑四:液體 |
2ml |
4℃ |
試劑五:液體 |
l |
4℃ |
說明書 |
一份 |
自備儀器和用品:
酶標儀/可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研缽、冰、乙醚和蒸餾水。
淀粉提?。?/span>
稱取0.01~0.02g烘干樣本(建議稱取約0.01g)于研缽中研碎,加入1ml試劑一,充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP管中,80℃水浴提取30min,3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入1ml試劑二(乙醚)振蕩5min,3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入1ml試劑三充分溶解,90℃水浴10min,冷卻后待測。
測定步驟:
1、分光光度計或酶標儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至620nm,蒸餾水調(diào)零。
測定管:在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20μL樣本, 14μL試劑四,120μL蒸餾水,2μL試劑五,44uL蒸餾水,混勻,測定620nm處吸光值,記為A測定。
空白管:在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20μL試劑三, 14μL試劑四,120μL蒸餾水,2μL試劑五,44μL蒸餾水,混勻,測定620nm處吸光值,記為A空白。
直鏈淀粉含量計算:
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y=1.755x+0.0062;x為標準品濃度(mg/ml),y為吸光值。
1、按照蛋白濃度計算
直鏈淀粉含量(mg/mg prot)=[(A測定-A空白-0.0062)×V1]÷1.755 ÷(V1×Cpr)=0.57×(A測定-A空白-0.0062) ÷Cpr
2、按樣本干重計算
直鏈淀粉含量(mg/g干重)= [(A測定-A空白-0.0062)×V1] ÷1.755÷(W×V1÷V2) =0.57×(A測定-A空白-0.0062) ÷W
V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.02ml;V2:加入提取液體積,1 ml;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本質(zhì)量,g
b.用96孔板測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y= 0.8775x+0.0062;x為標準品濃度(mg/ml),y為吸光值。
1、按照蛋白濃度計算
直鏈淀粉含量(mg/mg prot)=[(A測定-A空白-0.0062)×V1]÷0.8775 ÷(V1×Cpr)=1.14×(A測定-A空白-0.0062) ÷Cpr
2、按樣本干重計算
直鏈淀粉含量(mg/g干重)= [(A測定-A空白-0.0062)×V1] ÷0.8775/(W×V1÷V2) =1.14×(A測定-A空白-0.0062) ÷W
V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.02ml;V2:加入提取液體積,1 ml;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本質(zhì)量,g
最低檢測限為1mg/g干重或10μg/mgprot。