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產(chǎn)品信息

      美國List Labs公司是世界著名的科研毒素試劑供應(yīng)商，其產(chǎn)品包括難辨梭狀芽孢桿菌毒素A、B，志賀氏毒素，霍亂毒素，炭疽毒素（PA、LF、EF），百日咳毒素，白喉毒素，CRM197，破傷風(fēng)毒素，葡萄球菌腸毒素B，肉毒毒素，脂多糖（LPS），內(nèi)毒素等各類毒素，此外也提供相應(yīng)的毒素抗體與類毒素，包括破傷風(fēng)類毒素與難辨梭狀芽孢桿菌毒素A、B類毒素。

      百日咳毒素（Pertussis toxin，PTX）是一種由6個(gè)非共價(jià)連接亞基組成的多元件蛋白，分子量范圍約為9-28kDa，這些亞基分別命名為 S1，S2，S3，S4和S5，天然百日咳毒素中所占比為1:1:1:2:1，其中S4亞基以2倍形式存在。大亞基為S1（也稱為A啟動(dòng)子），包含 NAD+糖基水解酶和ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶活性。單獨(dú)的A啟動(dòng)子能夠?qū)?span>NAD+的ADP核糖轉(zhuǎn)移到Gαi，Gαo或Gαt家族G蛋白的α亞基。PTX的結(jié) 晶結(jié)構(gòu)顯示其呈金字塔形狀，A啟動(dòng)子位于塔尖，中間是S5，底端是二個(gè)二聚體，分別是S2-S4,和S3-S4。這5個(gè)亞基統(tǒng)稱為B寡聚體亞基 （S2，S3，S4，S4和S5），允許PTX進(jìn)入大部分細(xì)胞，使其粘附在包括TLR4和糖蛋白Ib在內(nèi)受體蛋白的多糖殘基上。通過受體介導(dǎo)的內(nèi) 吞作用進(jìn)入細(xì)胞后，PTX通過胞內(nèi)體途徑和高爾基體復(fù)合物逆向轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。A啟動(dòng)子從PTX上釋放出來，穿透內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜并導(dǎo)致目標(biāo) 膜偶聯(lián)的G蛋白失活。

      百日咳毒素（Pertussis toxin，PTX）由Bordetella pertussis代謝純化所得，一種多亞基毒素，與大多數(shù)哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞結(jié)合并特 定靶向G蛋白，抑制G蛋白及其在信號(hào)通路中的生理功能。PTX的生理效應(yīng)因G蛋白功能不同而變化。正是依賴Gi家族的蛋白偶聯(lián)受體來抑 制信號(hào)通路的能力，PTX是細(xì)胞生物學(xué)研究中的一種重要工具。PTX通過抑制和調(diào)節(jié)各種宿主對(duì)Bordetella pertussis的免疫反應(yīng)在傳染 方面發(fā)揮重要作用。鼠類動(dòng)物模型中PTX還能用來刺激建立實(shí)驗(yàn)性自身免疫疾病，比如實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（Experimental Autoimmune Encephalomyelitis，EAE）模型。

基本參數(shù)：

CAS NO：82248-93-9

純度：>95%

生物活性：

CHO細(xì)胞實(shí)驗(yàn)—依照Hewlett et al.方法，產(chǎn)生陽性反應(yīng)（CHO簇聚生長模式）所需PTX的低濃度為0.03ng/ml；依批次不同而有變 化。

腺苷酸環(huán)化酶實(shí)驗(yàn)：依照Wolff et al方法，在含1 μM鈣調(diào)蛋白的體系中，PTX的腺苷酸環(huán)化酶活性是9 picomoles/min/μg。依照 批次不同會(huì)有差異。

主要應(yīng)用： PTX常與MOG（35-55），PLP（139-151），PLP（178-191）等免疫肽聯(lián)合注射動(dòng)物，從而建立實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎 （Experimental Autoimmune Encephalomyelitis，EAE）模型，即用來研究多發(fā)性硬化癥（Mutiple sclerosis，MS）的常用動(dòng)物模 型。

List labs提供三種配方形式的百日咳毒素（Pertussis toxin，PTX），分別是甘油溶液（貨號(hào)：listlabs 179），溶于緩沖液的凍干粉（貨號(hào)： listlabs 180），以及溶于純水的凍干粉（貨號(hào)：listlabs 181）。三種形式的百日咳毒素。

白喉毒素在構(gòu)建細(xì)胞特異性細(xì)胞毒性免疫毒素中可用作毒素元素。具有天然內(nèi)體逃逸機(jī)制的細(xì)菌毒素易位結(jié)構(gòu)域已被用于開發(fā)有效的非病毒載體用于基因治療。

Biochem/physiol Actions

通過催化真核氨基轉(zhuǎn)移酶1的ADP-核糖基化抑制蛋白質(zhì)合成。

Physical form

含Tris和EDTA的凍干粉。

Reconstitution

當(dāng)用無菌蒸餾水將每管重懸至0.5mL時(shí),0.01 M Tris和0.001M Na2EDTA, pH 7.5

中含有~1mg的白喉毒素。

180 和181 都是凍干粉。180 是凍干的時(shí)候：緩沖液里含有：０.０１Ｍ的磷酸鹽緩沖液和０.０５Ｍ的Ｎacl,所以凍干成粉末后，里面還有緩沖液的鹽成分。181凍干的時(shí)候，不含鹽成分。區(qū)別就是：凍干粉180含鹽成分，181不含鹽成分。溶解的時(shí)候，直接用ddH2O 溶解就可以。在使用上沒有區(qū)別。