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Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml)

貨號(hào) M9333 售價(jià)(元) 668
規(guī)格 10mg CAS號(hào) 3513-03-9
  • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品信息

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

價(jià)格

M9333

Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml

10mg

668

M9337

Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml

5×10mg

2450

M9339

Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml

10×10mg

3873

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

Blasticidin S是一種來(lái)自Streptomyces griseochromogenes的核苷類抗生素,通過干擾核糖體中肽鍵的形成來(lái)特異性地抑制原核和真核生物的蛋白質(zhì)合成。Blasticidin S用于篩選攜帶有bsrBSD耐受基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞。殺稻瘟菌素具有快速而強(qiáng)效的作用模式,很低的抗生素濃度便能導(dǎo)致細(xì)胞迅速死亡。

  貨號(hào)M9333M9337,M9339均已均已液體形式提供,濃度為10 mg/mlin HEPES緩沖液,pH 7.5)。

抗性基因

目前已經(jīng)克隆和測(cè)序的殺稻瘟菌素耐受基因有3種,一種是分離自產(chǎn)生菌Streptoverticillum sp.的乙?;D(zhuǎn)移酶基因bls,另外兩種是脫氨酶基因,包括從Bacillus cereus 中分離的bsr和從Aspergillus terreus 中分離的BSD 基因。Bsr BSD基因是最常用的篩選標(biāo)志,用于哺乳動(dòng)物和植物細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn),也可用于E.Coli

產(chǎn)品性質(zhì)

分子式(Formula):C17H26N8O5·HCl

Cas:3513-03-9

分子量(Molecular Weight):458.9

外觀(Appearance):白色凍干粉末

純度(Purity):>95%HPLC

濃度:10 mg/ml in HEPES 緩沖液,pH 7.5

應(yīng)用參考濃度:

1)Escherichia coli

E. coli對(duì)Blasticidin S的敏感性稍差,但是轉(zhuǎn)化子對(duì)Blasticidin S具有耐受性,可以用低鹽LB培養(yǎng)基(pH 8)進(jìn)行篩選,濃度范圍為50-100 μg/ml Blasticidin S。高的pH值可以提高Blasticidin S的活性。

2)哺乳動(dòng)物細(xì)胞

哺乳動(dòng)物細(xì)胞中Blasticidin S的工作濃度范圍在1-50 μg/ml。初次實(shí)驗(yàn)建議通過滅殺曲線來(lái)確定佳使用濃度。

- 25-100 μg/ml in bacteria

- 1-30 μg/ml in mammalian cells

操作步驟(哺乳動(dòng)物穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選)

Blasticidin S通常使用濃度為10 μg/ml。攜帶bsrBSD基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,在含有Blasticidin S的正常生長(zhǎng)培養(yǎng)基中孵育,用于篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。

(1)轉(zhuǎn)染后48h,用含有適宜濃度Blasticidin S的新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞傳代(注:細(xì)胞處于活躍分裂期時(shí)抗生素工作好。細(xì)胞密度太高,抗生素效率降低。細(xì)胞分盤時(shí)覆蓋率不超過25%);

(2)每3-4天去除培養(yǎng)基,加入含抗生素的新鮮培養(yǎng)基;

(3)7天后檢測(cè)細(xì)胞集落形成。根據(jù)宿主細(xì)胞種類和轉(zhuǎn)染/篩選效率,集落形成可能需要增加一周或更久。

(4)轉(zhuǎn)移5-10個(gè)耐受克隆到35mm細(xì)胞盤中,加入選擇培養(yǎng)基維持培養(yǎng)7天。隨后用細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)。

相關(guān)產(chǎn)品:

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

儲(chǔ)存

M0943

潮霉素B Hyaromycin B 

1g

650

M0942

潮霉素B50 mg/mlHygromycin B (50 mg/ml)

1g

680

M0336

Phleomycin (20mg/ml) 腐草霉素(20 mg/ml

20mg

921

M1113

Zeocin博萊霉素(100 mg/ml

8×125mg

2200

M2150

Puromycin Dihydrochloride嘌呤霉素鹽酸鹽

25mg

678

CB937

Vancomycin Hydrochloride 鹽酸萬(wàn)古霉素

1g

1868

運(yùn)輸和保存方法

冰袋運(yùn)輸。-20℃,避免反復(fù)凍融,有效期一年。


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