體外受精(In Vitro Fertilization)是指哺乳動物的精子和卵子在體外人工控制的環(huán)境中完成受精過程的技術，英文簡稱為IVF。由于它與胚胎移植技術(ET)密不可分，又簡稱為IVF-ET。在生物學中，把體外受精胚胎移植到母體后獲得的動物稱試管動物(test-tube animal)。這項技術成功于20世紀50年代，在最近20年發(fā)展迅速，現(xiàn)已日趨成熟而成為一項重要而常規(guī)的動物繁殖生物技術。
體外受精技術對動物生殖機理研究、畜牧生產、醫(yī)學和瀕危動物保護等具有重要意義。如用小鼠、大鼠或家兔等作實驗材料，體外受精技術可用于研究哺乳動物配子發(fā)生、受精和胚胎早期發(fā)育機理。在家畜品種改良中，體外受精技術為胚胎生產提供了廉價而高效的手段，對充分利用優(yōu)良品種資源，縮短家畜繁殖周期，加快品種改良速度等有重要價值。在人類，IVF-ET技術是治療某些不孕癥和克服性連鎖病的重要措施之一。體外受精技術還是哺乳動物胚胎移植、克隆、轉基因和性別控制等現(xiàn)代生物技術不可缺少的組成部分。
體外受精過程需要從體內取出成熟的卵母細胞和精子，在離體條件下培養(yǎng)一段時間，然后進行人工授精，受精卵需要在體外培養(yǎng)發(fā)育成胚胎才能進行后續(xù)的應用（例如胚胎移植等），這些過程中由于脫離了母體的條件，需要用到各類的培養(yǎng)液模擬體內的生理環(huán)境，今天就來給大家介紹一下體外受精過程中常用的一些培養(yǎng)基：
卵母細胞的培養(yǎng)：
卵母細胞體外成熟是一個復雜的過程，細胞質和細胞核需要發(fā)生一系列聯(lián)系性的結構和分子方面的變化，才能完成胞核和胞質的成熟。大量研究證明哺乳動物卵母細胞體外成熟所采用的培養(yǎng)液不僅對卵母細胞的成熟，而且對受精和隨后的胚胎發(fā)育均有著顯著的影響。目前對牛卵母細胞體外成熟的研究主要集中在以TCM199為基礎培養(yǎng)液，再添加激素，血清，卵泡液， 生長因子及顆粒細胞等成分來模擬卵母細胞體內成熟的環(huán)境以及各種成分間的相互作用以期達到與體內相當?shù)某墒煨Ч?/span>
常用的卵母細胞成熟培養(yǎng)液配方：
基礎培養(yǎng)液為TCM-199，添加10%FCS，25mM Hepes、0.55mg/ml丙酮酸鈉及100IU青、鏈霉素；
精子的獲能及卵子受精：
精子獲能：哺乳動物精子的獲能方法有培養(yǎng)和化學誘導兩種方法。牛、羊的精子常用化學藥物誘導獲能，誘導獲能的藥物常用肝素和鈣離子載體。受精：即獲能精子與成熟卵子的共培養(yǎng)，除鈣離子載體誘導獲能外，精子和卵子一般在獲能液中完成受精過程。受精培養(yǎng)時間與獲能方法有關。在B2液中一般為6-8小時而用TALP液作受精液時可培養(yǎng)18~24h。精子和卵子常在小滴中共培養(yǎng)，受精時精子密度為1~9×106/ml，每10微升精液中放人1~2枚卵子，小滴體積一般為50~200微升。
精子細胞培養(yǎng)液配方推薦：
精子洗滌液：BO/TALP基礎液+6mg/ml BSA(FractⅤ)+5mM咖啡因
精子獲能液：BO/TALP基礎液+6mg/ml BSA(FractⅤ)+5mM咖啡因+60ug/ml肝素
胚胎體外培養(yǎng)：
胚胎培養(yǎng)液分為復雜的和化學成分明確的培養(yǎng)液兩大類。復雜培養(yǎng)液中的成分很多，除無機和有機鹽外，還添加維生素、氨基酸、核苷酸和嘌呤等營養(yǎng)成分和血清。常用的胚胎培養(yǎng)基有M199、KSOM和F10，用它們培養(yǎng)胚胎時，可以采用體細胞共培養(yǎng)體系，即體細胞與胚胎在微滴中共同培養(yǎng)，利用體細胞生長過程中分泌的有益因子，促進胚胎發(fā)育，克服發(fā)育阻斷。
常見胚胎體外培養(yǎng)液配方推薦：
M199+10%FCS+2.2mg/100ml丙酮酸鈉+100IU/ml雙抗
mSOF+10%FCS+2.2mg/100ml丙酮酸鈉+100IU/ml雙抗
產品推薦：
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產品名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
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HEPES-TALP培養(yǎng)液 |
500ml、6*500ml |
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IVF-TALP培養(yǎng)液（TALP基礎培養(yǎng)液） |
100ml、6*100ml |
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sperm-TALP培養(yǎng)液 |
IVL03 |
100ml、6*100ml |
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KSOM+AA培養(yǎng)基 |
100ml、6*100ml |
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SOF（合成輸卵管液）培養(yǎng)基 |
IVL05 |
100ml、6*100ml |
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KSOM+AA（無蛋氨酸） |
IVL08 |
100ml、6*100ml |
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M199 |
MDP02、MDP04 |
10LT，50LT，10*1LT |
上述培養(yǎng)基成分表：
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組分 |
IVL01 |
IVL02 |
IVL03 |
IVL04 |
IVL05 |
IVL08 |
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Glycine（甘氨酸） |
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3.75 |
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3.75 |
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L-Alanine（丙氨酸） |
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4.45 |
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4.45 |
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L-Arginine,Hydrochloride |
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63.20 |
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63.20 |
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L-Asparagine,Monohydrate |
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7.50 |
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7.50 |
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L-AsparticAcid（天冬氨酸） |
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6.66 |
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6.66 |
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L-Cystine（胱氨酸） |
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12.02 |
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12.02 |
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L-Glutamine（谷氨酰胺） |
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146.15 |
29.23 |
146.15 |
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L-Histidine,Anhydrous（組氨酸） |
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20.96 |
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20.96 |
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L-Isoleucine（異亮氨酸） |
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26.23 |
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26.23 |
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L-Leucine（亮氨酸） |
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26.24 |
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26.24 |
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L-Lysine,Hydrochloride（賴氨酸） |
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36.52 |
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36.52 |
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L-Methionine（甲硫氨酸） |
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7.46 |
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L-Phenylalanine（苯丙氨酸） |
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16.52 |
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16.52 |
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L-Proline（脯氨酸） |
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5.76 |
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5.76 |
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L-Serine（絲氨酸） |
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5.26 |
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5.26 |
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L-Tryptophan（色氨酸） |
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5.11 |
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5.11 |
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L-Tyrosine（酪氨酸） |
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18.12 |
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18.12 |
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L-Valine（纈氨酸） |
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23.42 |
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23.42 |
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CalciumChloride,Anhydrous |
220.2 |
222.2 |
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CalciumChloride,Dihydrate |
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310 |
250.0 |
261.68 |
250 |
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EDTA,DisodiumSalt,Dihydrate |
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3.72 |
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3.72 |
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MagnesiumChloride,Hexahydrate |
83.9 |
101.65 |
81.32 |
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MagnesiumSulfate,Heptahydrate |
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49.3 |
372.18 |
49.3 |
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PotassiumChloride |
238.72 |
238.4 |
230.95 |
186.38 |
533.78 |
186.38 |
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PotassiumPhosphate, |
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47.99 |
161.95 |
47.99 |
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SodiumBicarbonate（碳酸氫鈉） |
168 |
2100 |
2100 |
2100.25 |
2100.25 |
2100.25 |
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SodiumChloride（氯化鈉） |
6669 |
6669 |
5850 |
5551.79 |
6293.99 |
5551.8 |
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SodiumPhosphate,Monobasic, |
48 |
55.2 |
40.02 |
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BovineSerumAlbumin,FractionV |
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1000 |
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1000 |
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CitricAcid,Trisodium |
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99.99 |
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D-Glucose,Anhydrous |
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36.03 |
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36.03 |
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HEPES |
2384 |
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2383 |
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PhenolRed,SodiumSalt |
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10.0 |
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PyruvicAcid,SodiumSalt |
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22 |
44.02 |
22.0 |
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SodiumL-Lactatesolution(60%) |
1.416 |
1.416 |
3.6800 |
1.416 |
0.757 |
1.416 |
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Myo-Inositol（肌醇） |
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499.04 |
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