久久久精品免费视频,三及精品视频,激情综合专区,亚洲色福利网站

歡迎蒞臨南京沃博生物科技有限公司官方網(wǎng)站!

當(dāng)前位置: 首頁(yè) - 新聞中心 - 專業(yè)知識(shí)

CoHIT:一種簡(jiǎn)便、快速、精準(zhǔn)的CRISPR基因檢測(cè)技術(shù)

近日,中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院深圳農(nóng)業(yè)基因組研究所(嶺南現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科學(xué)與技術(shù)廣東省實(shí)驗(yàn)室深圳分中心)聯(lián)合武漢大學(xué)中南醫(yī)院在學(xué)術(shù)期刊《自然·通訊(Nature Communications)》上在線發(fā)表了題為“CoHIT: a one-pot ultrasensitive ERA-CRISPR system for detecting multiple same-site indels”的研究論文

 

 

近日,中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院深圳農(nóng)業(yè)基因組研究所(嶺南現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科學(xué)與技術(shù)廣東省實(shí)驗(yàn)室深圳分中心)聯(lián)合武漢大學(xué)中南醫(yī)院在學(xué)術(shù)期刊《自然·通訊(Nature Communications)》上在線發(fā)表了題為“CoHIT: a one-pot ultrasensitive ERA-CRISPR system for detecting multiple same-site indels”的研究論文。該研究利用蛋白進(jìn)化和理念創(chuàng)新,實(shí)現(xiàn)對(duì)同一基因位點(diǎn)上大量不同類型的突變(indels)進(jìn)行快速、精準(zhǔn)且簡(jiǎn)便的檢測(cè)。CoHIT檢測(cè)技術(shù)采用了一管法操作流程,從樣品準(zhǔn)備到最終結(jié)果讀取,整個(gè)過(guò)程在常溫下僅需30分鐘,且能精準(zhǔn)檢測(cè)到萬(wàn)分之一的核酸變異。該技術(shù)有望在精準(zhǔn)分子育種、食品安全監(jiān)控、傳染病早期預(yù)警、遺傳疾病篩查及腫瘤精準(zhǔn)診療等多個(gè)領(lǐng)域中發(fā)揮重要作用。

精準(zhǔn)核酸檢測(cè)在疾病診斷、精準(zhǔn)醫(yī)療及農(nóng)業(yè)應(yīng)用等領(lǐng)域具有重要意義。然而,目前臨場(chǎng)快速核酸檢測(cè)方法在面對(duì)同一基因位點(diǎn)的多種indels時(shí),往往面臨檢測(cè)覆蓋率不足的挑戰(zhàn)。為了解決這一問(wèn)題,研究團(tuán)隊(duì)利用蛋白進(jìn)化技術(shù)篩選出具有高耐受度的Cas蛋白,并創(chuàng)新性地提出了利用單一crRNA識(shí)別多種突變類型的理念,成功構(gòu)建了CoHIT(Cas12a-based One-for-all High-speed Isothermal Test)新型CRISPR檢測(cè)平臺(tái)。

 

1 | CoHIT檢測(cè)技術(shù)

CoHIT系統(tǒng)的核心在于一種改良的AsCas12a蛋白,即enAsU-R,它僅需一條crRNA就能靶向多個(gè)不同的變異體。通過(guò)對(duì)AsCas12a的功能區(qū)域進(jìn)行氨基酸替換,研究人員成功提高了蛋白的錯(cuò)配耐受性和PAM性能,使其能識(shí)別與crRNA序列有少量堿基錯(cuò)配的靶標(biāo)DNA。在CoHIT檢測(cè)系統(tǒng)中,Cas12a/crRNA復(fù)合體能識(shí)別并切割多個(gè)Indel變異體,從而觸發(fā)ssDNA切割活性,釋放出熒光信號(hào),而野生型DNA則由于與crRNA識(shí)別序列的不同而無(wú)法引發(fā)熒光信號(hào),保證了檢測(cè)的特異性。

 

2 | 對(duì)Cas12a變體進(jìn)行工程改造以提高錯(cuò)配耐受性

通過(guò)一系列參數(shù)優(yōu)化,包括緩沖液配方、反應(yīng)溫度和組分濃度調(diào)整,CoHIT技術(shù)對(duì)NPM1基因突變的常見(jiàn)亞型達(dá)到了0.01%的檢測(cè)靈敏度,且在30分鐘內(nèi)迅速給出結(jié)果,同時(shí)有效避免了野生型DNA的交叉反應(yīng)。這一特性使得CoHIT在急性髓系白血?。ˋML)患者NPM1突變檢測(cè)中表現(xiàn)卓越,準(zhǔn)確檢測(cè)出108名患者中的30名攜帶NPM1突變個(gè)體,且在監(jiān)測(cè)微小殘留病灶(MRD)方面展現(xiàn)了巨大的潛力。

 

3 | 使用CoHIT系統(tǒng)檢測(cè)臨床樣本和MRD

此外,通過(guò)與側(cè)向流檢測(cè)條(LFA)和微流控芯片的結(jié)合,CoHIT系統(tǒng)的適應(yīng)性和多重檢測(cè)能力得到了顯著提升,為現(xiàn)場(chǎng)即時(shí)檢測(cè)提供了可能。研究人員建立了CoHIT-LFA系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)了現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。同時(shí),CoHIT技術(shù)與微流控裝置集成,通過(guò)一次上樣即可同時(shí)檢測(cè)7個(gè)靶標(biāo),展示了CoHIT檢測(cè)的靈活性和多路復(fù)用潛力。

 

4 | CoHIT-LFA系統(tǒng)及基于微流控芯片的CoHIT檢測(cè)

CoHIT技術(shù)的成功研發(fā)和不斷優(yōu)化,不僅簡(jiǎn)化了檢測(cè)流程,還大大提升了檢測(cè)速度與準(zhǔn)確性,為分子育種、疾病早期診斷、遺傳病篩查和食品安全監(jiān)測(cè)等眾多領(lǐng)域提供了強(qiáng)有力的工具。

武漢大學(xué)中南醫(yī)院博士后劉銀和中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院深圳農(nóng)業(yè)基因組研究所劉馨怡副研究員為該論文共同第一作者,武漢大學(xué)中南醫(yī)院周芙玲教授和中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院深圳農(nóng)業(yè)基因組研究所王鑫杰研究員與李奎教授為該論文共同通訊作者。本研究得到了國(guó)家自然科學(xué)基金、廣東省粵深聯(lián)合基金、深圳市杰出人才項(xiàng)目的支持。

Cas酶系列

貨號(hào)

包裝規(guī)格

中文名稱

32108-01

100 pmoL

LbCas12a (Cpf1)

32108-03

1,000 pmoL

LbCas12a (Cpf1)

32117-01

100 pmoL

LwaCas13a (C2c2)

32117-03

1,000 pmoL

LwaCas13a (C2c2)

32118-01

100 pmoL

AapCas12b (C2c1)

32118-03

1,000 pmoL

AapCas12b (C2c1)

32119-01

100 pmoL

Un1Cas12f1 (Cas14a1)

32119-03

1,000 pmoL

Un1Cas12f1 (Cas14a1)

32104-01

100 pmoL

AsCas12a (Cpf1)

32104-03

1,000 pmoL

AsCas12a (Cpf1)

32116-01

100 pmoL

AacCas12b (C2c1)

32116-03

1,000 pmoL

AacCas12b (C2c1)

32106-01

100 pmoL

FnCas12a (Cpf1)

32106-03

1,000 pmoL

FnCas12a (Cpf1)

32110-01

100 pmoL

Lb5Cas12a (Cpf1)

32110-03

1,000 pmoL

Lb5Cas12a (Cpf1)

32101-01

100 pmoL

SpCas9

32101-03

1,000 pmoL

SpCas9

32102-01

100 pmoL

Sp-dCas9

32102-03

1,000 pmoL

Sp-dCas9

32120-01

100 pmoL

Sp-nCas9(H840A)

32120-03

1,000 pmoL

Sp-nCas9(H840A)

 

 

 

搞B免费在线观看| 日韩乱码人妻| 日本舔b久久免费网站| 欧美一二三区黄色片| 制服丝袜电影网站污| 看乱伦黄片免费| 欧美欧精品欧美日韩| 人妻少妇91精品一区二区电影| 中文字幕一区二区国产 欧美| 亚洲日韩欧美首页| 日韩性免费视频| 天天擦天天躁日韩| 亚洲欧美一区二区精品久久久| 欧美91精品久久久久网| www.大香蕉com.| 经典无码一区二区三区| 久久久亚洲精品高潮抽搐| 色综合365| 美国精品久久在线播放| 天天黄色免费视频| 日本熟妇五十路视频| 大鸡巴日逼逼一进一出一区69| 91 色Pro在线| 久久久韩国日本| 91人人视频白丝| 伊人在线精品视频| 五月综合久久| 制服丝袜美女中文字幕| 精品久久人人爽天| 亚洲视屏色诱| 色偷偷中文有码| 成人99涩| 欧美偷拍自一区| 美女被大鸡巴爆操av| 不卡一区二区成人| 亚洲狼人精品一区二区三区| 久久综合少妇精品视频| 日韩中文字幕电影视频| 欧美 不卡 久久| 日本韩国欧美国产精品一区二区| www.69av|