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德國Biontex轉(zhuǎn)染試劑簡介
      Biontex 公司成立于1998年，其總部位于德國慕尼黑附近的Martinsried，專注于轉(zhuǎn)染試劑的研發(fā)和應(yīng)用。
（一） K2^? Transfection System ，Biontex最新產(chǎn)品
全新高效的哺乳動(dòng)物細(xì)胞DNA和mRNA轉(zhuǎn)染工具

產(chǎn)品特點(diǎn)：

      真核細(xì)胞依賴自身的先天性免疫系統(tǒng)，能夠識(shí)別并抑制外來物質(zhì)（如脂多糖、細(xì)菌、病毒核酸及蛋白質(zhì)）的入侵。此外，細(xì)胞還可以將這些外來物質(zhì)的信息通過信號(hào)分子傳導(dǎo)給相鄰的細(xì)胞，使這些臨近細(xì)胞在無需接觸病原體的情況下產(chǎn)生防御體系。
為降低細(xì)胞自身的免疫反應(yīng)，提高基因轉(zhuǎn)染效率，Biontex公司最新開發(fā)了K2? Transfection System，由K2^? Transfection Reagent 和 K2^? Multiplier兩部分組成。K2^? Transfection Reagent是一種高效的陽離子脂質(zhì)，而K2^?Multiplier則可以降低細(xì)胞對(duì)外來核酸及脂質(zhì)體的免疫反應(yīng)。
應(yīng)用實(shí)例1：

      K2轉(zhuǎn)染pCMV-GFP的效率? 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)和Metafectene Pro與幾種細(xì)胞系的市售轉(zhuǎn)染試劑L2k進(jìn)行了比較。
應(yīng)用實(shí)例2：

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（二）METAFECTENE^? SI⁺
特別適合于siRNA或miRNA mimic/inhibitor的高效轉(zhuǎn)染試劑
特點(diǎn):
      METAFECTENE^? SI⁺是一種脂質(zhì)復(fù)合物，經(jīng)特殊優(yōu)化適用于siRNA和microRNA轉(zhuǎn)染（siCOM技術(shù)），綜合了Biontex公司RMA和TOP技術(shù)的特點(diǎn)，具有沉默效率高、RNA聚合和毒性低等優(yōu)點(diǎn)，適用于所有細(xì)胞系和原代細(xì)胞。
siCOM技術(shù)(siRNA adjusted Composition)
不同于一般的DNA轉(zhuǎn)染試劑，本技術(shù)不需要將siRNA和miRNA轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核。因此，METAFECTENE^? SI⁺主要目的在于大化的內(nèi)吞作用并快速*釋放RNA進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。

轉(zhuǎn)基因HeLa-GFP細(xì)胞GFP表達(dá)序列的研究? SI+和siRNA直接作用于GFP的mRNA。清晰可見的是GFP表達(dá)在72小時(shí)內(nèi)下降到最大值。

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（三） METAFECTENE? EASY
更快、更簡便、更高效的轉(zhuǎn)染技術(shù)

特點(diǎn)：

      在開發(fā)第二代DNA轉(zhuǎn)染試劑（METAFECTENE^?及其升級(jí)版本METAFECTENE^?PRO）的時(shí)候，Biontex的主要目標(biāo)是大化轉(zhuǎn)染效率(RMA技術(shù))和最小化毒性作用(TOP技術(shù))。進(jìn)一步開發(fā)的Biontex FEE技術(shù)預(yù)示著第三代質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑的開始：METAFECTENE^?EASY⁺。
FEE技術(shù)
FEE技術(shù)是優(yōu)化的具更高轉(zhuǎn)染效率的技術(shù)，通過固定DNA /脂質(zhì)體比率和轉(zhuǎn)染復(fù)合物體積而適用于廣泛的細(xì)胞類型。不需要針對(duì)每種細(xì)胞類型進(jìn)行費(fèi)時(shí)、費(fèi)力的條件優(yōu)化。
變質(zhì)體? EASY的轉(zhuǎn)染效率與METAFECTENE相當(dāng)? 無需優(yōu)化DNA/脂質(zhì)體（深藍(lán)色柱：COS-7，淺藍(lán)色柱：HeLa細(xì)胞）。
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（四）METAFECTENE^? PRO
真核細(xì)胞的高效、低毒性轉(zhuǎn)染試劑
      METAFECTENE^? PRO是針對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的新一代轉(zhuǎn)染試劑。采用毒性優(yōu)化技術(shù)（TOP技術(shù)），Biontex成功地降低了轉(zhuǎn)染試劑對(duì)細(xì)胞的毒性，并顯著提高DNA進(jìn)入細(xì)胞的效率。除了能加強(qiáng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率之外，METAFECTENE^? PRO的另一個(gè)主要特點(diǎn)是提高細(xì)胞內(nèi)基因的表達(dá)。

      TOP技術(shù)(Toxicity Optimization Module)
毒性最小化是現(xiàn)代轉(zhuǎn)染試劑達(dá)到效率和廣泛應(yīng)用性的首要前提條件。TOP技術(shù)的基本準(zhǔn)則是模擬物質(zhì)天然結(jié)構(gòu)，加強(qiáng)生物降解能力，提高細(xì)胞耐受性。另外，通過物理化學(xué)修飾，降低脂質(zhì)復(fù)合體的穩(wěn)定性，從而促進(jìn)DNA在細(xì)胞質(zhì)的釋放。

METAFECTENE轉(zhuǎn)染效率的比較? PRO與各種細(xì)胞系（代謝物）? 100%)
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（五）METAFECTENE^?

RMA技術(shù)(Repulsive Membrane Acidolysis)
      排斥膜酸水解（RMA）技術(shù)，一方面能促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)涵體中“質(zhì)子海綿”的活性，另一方面能促進(jìn)脂質(zhì)體復(fù)合物分解，通過小片段質(zhì)子化結(jié)構(gòu)模擬磷脂結(jié)構(gòu)。當(dāng)內(nèi)涵體處于酸性環(huán)境時(shí)，正電荷累積在脂質(zhì)體復(fù)合物的磷脂雙分子結(jié)構(gòu)中，通過電荷的排斥力，這些電荷最終引起脂質(zhì)體復(fù)合物的分解，同時(shí)高效地將DNA/RNA釋放到細(xì)胞質(zhì)中。
最后，胞質(zhì)中非絡(luò)合的DNA/RNA急劇增多，以DNA為例，這個(gè)結(jié)果導(dǎo)致其在胞質(zhì)中的活性顯著提升，DNA與細(xì)胞核接觸的可能性增加，從而大大提高轉(zhuǎn)染效率。
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