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橫向流動試紙條LFD試紙，為什么要做成Red-Blue雙色

   剛接觸Lateral flow產(chǎn)品的時候，要么是膠體金，要么是紅乳膠。也沒有想過還有更多變化。直到看到梅里埃之前的VIKIA系列的快診產(chǎn)品，才意識到彩色乳膠，可紅，可藍(lán)，可黃，可綠，可彩虹。
有些產(chǎn)品就采用了多色顆粒在一個產(chǎn)品上。接觸過一個流感的產(chǎn)品，C線綠色，甲流藍(lán)色，乙流紅色。
還有一種就是C線變色的設(shè)計，如BinaxNow的新冠抗原試劑

   在使用之前，就有一條藍(lán)色C線。在完成測試之后，C線從藍(lán)色變成紅色。
今天介紹一款核酸試紙，來自南京沃博生物的Red-Blue雙色核酸試紙。它采用雙色系統(tǒng)不僅僅是為了好看，還有一番別出心裁。
   沃博生物的核酸試紙的原理也是非常類似的，但是親和素用來偶聯(lián)了金顆粒，抗FITC抗體用來包被了T線。同時采用紅色膠體金顆粒對應(yīng)T線和藍(lán)色乳膠顆粒對應(yīng)C線。

當(dāng)使用快速等溫擴(kuò)增核酸，特別是RPA系統(tǒng)時，很容易出現(xiàn)假陽性結(jié)果
通過使用Red-Blue雙色系統(tǒng)，當(dāng)出現(xiàn)假陽性結(jié)果時，就可以進(jìn)行快速的假陽性分析。 

假陽1，如果T線紅色比較強，可能核酸擴(kuò)增出假陽 

假陽1，如果T線紅色比較弱，可能引物形成二聚體

假陽2，如果T線藍(lán)色假陽，修飾了FITC的這段引物具備了捕獲Mouse IgG的特性，成了一個Aptamer

這樣可以幫助科研人員快速的進(jìn)行Trouble shooting, 也是多色系統(tǒng)一種創(chuàng)新的應(yīng)用。

還把單T線升級到了雙T線，實現(xiàn)雙靶標(biāo)雙系統(tǒng)檢測。

并且雙系統(tǒng)T線采用獨立的系統(tǒng)，相互不會干擾和競爭

單T線，

biotin-DNA-FITC

雙T線，

biotin-DNA-FITC 

Digoxin-DNA-TAMRA 

除了上述的彩虹核酸試紙，也有用于CRISPR的Cas12/13專用核酸檢測試紙條。并且好調(diào)試好了檢測濃度。

檢測探針質(zhì)量

在陰性對照中，稀釋探針的濃度至200 nM，進(jìn)行切割反應(yīng)。當(dāng)試紙條結(jié)合墊端浸入Cas12/Cas13切割產(chǎn)物后的5~7 min內(nèi)，試紙條T線顯色，即說明探針含游離的Biotin或者游離的FITC，探針純度不足導(dǎo)致假陽性結(jié)果。建議更換探針合成供應(yīng)商，重新合成探針。

探針載量接受范圍

探針使用濃度為20~50nM的情況下，試紙條結(jié)合墊端浸入Cas12/Cas13切割產(chǎn)物后的30 min內(nèi)，T線均不會顯色。

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