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超快SDS-PAGE凝膠制備試劑盒(ZD304C)
北京莊盟生物研制的超快SDS-PAGE凝膠制備試劑盒提供了一種快速制備PAGE凝膠所需的各種試劑,用戶只需自備制膠設(shè)備即可配膠,大大簡(jiǎn)化了制膠過(guò)程。
優(yōu)勢(shì)特點(diǎn):
簡(jiǎn)單快速:無(wú)需復(fù)雜配制,只需要1:1添加即可。
快速制備凝膠:最少只需動(dòng)手操作2min即可灌制多塊凝膠,無(wú)需計(jì)算所需溶液量,無(wú)需稀釋;
彩色上層膠:可制備紅藍(lán)綠三種顏色的上層膠,為點(diǎn)樣和區(qū)分不同凝膠提供最大 便利;
避免異味:無(wú)需使用TEMED,避免惡臭氣味;
條帶清晰:尤其小分子蛋白質(zhì)條帶比在傳統(tǒng)凝膠中更清晰
使用步驟:
1 根據(jù)目的蛋白的分子量大小選擇合適的凝膠濃度(參考表1)
2 制膠流程(以一塊0.75/ 1.0/ 1.5 mm的mini膠為例)
1)取等體積2×分離膠緩沖液和2×分離膠溶液混勻,即取兩種溶液各2.0/ 2.7/ 4.0 mL。
2)往步驟1中的混合溶液中加入40/ 60/ 80 μL的改良型過(guò)硫酸銨溶液,充分混勻。
3)將步驟2中的溶液注入制膠玻璃板中,加入適量水或醇(如乙醇、正丁醇等)覆蓋于分離膠之上。
4)待分離膠充分凝固后,倒去上層水或醇。
5)取等體積濃縮膠緩沖液和濃縮膠溶液混勻,即取兩種溶液各0.5/ 0.75/ 1.0 mL,然后加入10/ 15/ 20 μL的改良型過(guò)硫酸銨溶液,充分混勻。
6)注入制膠玻璃板中,插入梳齒。
7)待濃縮膠凝固后,拔去梳齒即可用于電泳。
凝膠電泳:
使用Tris-甘氨酸電泳液,推薦電泳條件:設(shè)定電壓80V,電泳約30分鐘,樣品進(jìn)入分離膠后,調(diào) 整電壓至120V,約1小時(shí)后,樣品電泳至凝膠底部,停止電泳。
儲(chǔ)存條件:
4℃保存; 室溫運(yùn)輸。
10%過(guò)硫酸銨:加10ml 雙蒸水配制為10%溶液。務(wù)必分裝成0.5ml或一天內(nèi)使用量的小管-20℃保 存,短期可暫時(shí)放4℃;通常凍存狀態(tài)下一年內(nèi)有效。 過(guò)硫酸銨粉末可以室溫長(zhǎng)期保持,潮解會(huì)完全失 活,務(wù)必密封保存。
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