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鬼筆環(huán)肽(phalloidin 鬼筆鵝膏素)——細(xì)胞骨架的染色神器

鬼筆環(huán)肽(phalloidin 鬼筆鵝膏素)

——細(xì)胞骨架的染色神器

鬼筆環(huán)肽是從毒蕈類(lèi)鬼筆鵝膏(Amanita phalloides)中得到的有毒環(huán)狀七肽,它的作用與細(xì)胞松弛素B恰好相反, 只與聚合的微絲結(jié)合, 而不與肌動(dòng)蛋白單體分子結(jié)合。鬼筆環(huán)肽通過(guò)與聚合的微絲結(jié)合, 抑制了微絲的解體, 破壞了微絲的聚合和解聚的動(dòng)態(tài)平衡。用FITC和Rhodamin等熒光物質(zhì)標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽可特異的與真核細(xì)胞的F-actin結(jié)合,從而顯示微絲骨架在細(xì)胞中的分布。

warbio生物提供多款不同熒光基團(tuán)標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽,可以滿(mǎn)足您多標(biāo)實(shí)驗(yàn)的不同需。

產(chǎn)品特點(diǎn):

1)親和力高:Kd= 20 nM;

2)特異性強(qiáng):選擇性結(jié)合于絲狀肌動(dòng)蛋白F-actin,而不會(huì)與單體肌動(dòng)蛋白G-actin結(jié)合;

2)優(yōu)于抗體染色:鬼筆環(huán)肽無(wú)物種限制,且?guī)缀醪淮嬖诜翘禺愋匀旧?,染色區(qū)和非染色區(qū)域?qū)Ρ刃詷O其明顯;

4)靈敏度高:納摩爾濃度(nM)染色即可滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)要求;

5)兼容性好,肌動(dòng)蛋白活力不受影響:鬼筆環(huán)肽衍生物很小,直徑約12-15?,分子量<2000 Da,標(biāo)記后的肌動(dòng)蛋白許多生理特性都得以維持;

6)適用范圍廣:無(wú)物種差異性;同樣適用于甲醛固定和打孔處理后的組織樣本。

實(shí)驗(yàn)流程:


鬼筆環(huán)肽的配制:

0.1mg鬼筆環(huán)肽溶于1ml無(wú)水甲醇(也可用DMSO或無(wú)水乙醇溶解)配成貯存液,可在-20度避光的條件下長(zhǎng)期保存,工作液的濃度為5ug/ml,由貯存液加生理鹽水PBS稀釋20倍即可。

染色程序:

生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次,每次10分鐘;3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分鐘,生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次;加入5ug/ml的FITC-鬼筆環(huán)肽室溫染色30-60分鐘,夏季時(shí)間可以短一些,生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次;DAPI或hoechst33258染細(xì)胞核10分鐘,生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次;吸去多余水分,加熒光封片液(中性或偏堿性緩沖液加等量甘油),蓋上蓋玻片,熒光或共聚焦顯微鏡下觀(guān)察。

染色結(jié)果:

相關(guān)產(chǎn)品:

貨號(hào)

產(chǎn)品

規(guī)格

單價(jià)/

LX1801

iFluor? 488 phalloidin iFluor? 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)

300T

1857

LX2801

iFluor? 555 phalloidin iFluor? 555標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(橘色)

300T

1857

LX3032

LysoTracker Green DND-26 溶酶體綠色熒光探針

50μl

428

LX4032

LysoTracker Red DND-99 溶酶體紅色熒光探針

50μl

428

LX5242

MitoTracker? Red CM-H2XRos線(xiàn)粒體紅色熒光探針

50μg

428

LX6252

MitoTracker? Red CMXRos 線(xiàn)粒體紅色熒光探針

50μg

428

LX7262

MitoTracker? Green FM 線(xiàn)粒體綠色熒光探針

50μg

428

LX8272

MitoTracker? Deep Red FM 線(xiàn)粒體遠(yuǎn)紅色熒光探針

50μg

428

J705S3

JC-1 線(xiàn)粒體膜電位熒光探針

1mg

768

J705S8

JC-1 線(xiàn)粒體膜電位熒光探針

5mg

2858




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