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       人乳頭瘤病毒（HPV）是一組環(huán)狀雙鏈DNA（dsDNA）病毒。HPV可以根據(jù)其致癌特性大致分為低風(fēng)險(xiǎn)和高風(fēng)險(xiǎn)亞型。HPV16和HPV18是兩種最常見(jiàn)的高危HPV亞型，引起70%的侵襲性宮頸癌。目前的HPV檢測(cè)方法存在操作繁瑣、通量低、設(shè)備復(fù)雜等缺點(diǎn)。

據(jù)麥姆斯咨詢報(bào)道，2023年2月1日，中科院精密測(cè)量院核酸復(fù)合物結(jié)構(gòu)與功能研究組聯(lián)合武漢大學(xué)高等研究院胥國(guó)勇課題組在Analytical Chemistry在線發(fā)表了題為“Integrating CRISPR-Cas12a into a Microfluidic Dual-Droplet Device Enables Simultaneous Detection of HPV16 and HPV18”的研究論文。

基于CRISPR診斷系統(tǒng)的高特異性、敏感性以及微流控技術(shù)強(qiáng)大的液體控制能力，該研究開(kāi)發(fā)了一種同時(shí)檢測(cè)HPV16和HPV18的微流控雙液滴裝置（M-D3）。該裝置通過(guò)結(jié)合CRISPR-Cas12a系統(tǒng)和多重RPA技術(shù)，可用于同時(shí)檢測(cè)HPV16和HPV18。在此液滴微流控平臺(tái)中，RPA對(duì)靶標(biāo)先進(jìn)行擴(kuò)增，再利用CRISPR-Cas系統(tǒng)對(duì)擴(kuò)增后的目標(biāo)核酸進(jìn)行檢測(cè)。由于M-D3可以平行產(chǎn)生兩組液滴，因此HPV16-crRNA/綠色報(bào)告分子和HPV18-crRNA/紅色報(bào)告分子可以分別封裝在相關(guān)液滴中。當(dāng)有靶標(biāo)存在時(shí)，將觸發(fā)Cas12a的非特異性切割活性，并對(duì)報(bào)告分子進(jìn)行切割，生成相應(yīng)的熒光信號(hào)，用于核酸檢測(cè)。根據(jù)熒光顏色和強(qiáng)度，我們可以區(qū)分樣本為HPV16/HPV18陽(yáng)性或陰性。

圖一 M-D3檢測(cè)平臺(tái)的工作原理

該研究采用M-D3評(píng)估臨床人類患者樣本中的HPV16/HPV18感染情況。結(jié)果表明，M-D3芯片上讀取的結(jié)果與臨床結(jié)果高度一致，其敏感性和特異性分別為92.3%和100%。M-D3平臺(tái)具有操作方便、檢測(cè)時(shí)間短、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)，對(duì)傳染病的有效診斷具有重要意義，在多路核酸檢測(cè)方面具有巨大的應(yīng)用潛力。

圖二 臨床患者樣本中的HPV16和HPV18在M-D3平臺(tái)同時(shí)檢測(cè)

武漢大學(xué)高等研究院胥國(guó)勇教授，中科院精密測(cè)量院劉買利院士團(tuán)隊(duì)的李穎研究員、楊運(yùn)煌研究員為通訊作者，武漢大學(xué)高等研究院/精密測(cè)量院聯(lián)培博士生趙銀為本文第一作者。該研究工作由國(guó)家自然科學(xué)基金、國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃提供經(jīng)費(fèi)支持。

論文鏈接：https://doi.org/10.1021/acs.analchem.2c05320

貨號(hào)	產(chǎn)品	規(guī)格
JY0209	雙靶標(biāo)HybriDetect側(cè)向?qū)游鲈嚰垪l（彩虹型）	50T
JY0307	Tiosbio? CRISPR單酶切及擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)試紙條	50T
JY0301	CRISPR Cas12/13 HybriDetect試紙條	50T
JY0308	Tiosbio? CRISPR雙酶切核酸檢測(cè)試紙條（變色龍）	50T
WLB8201KIT	DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（基礎(chǔ)型）	48T
WLE8202KIT	DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（熒光型）	48T
WLN8203KIT	DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（膠體金試紙條型）	48T
WLRB8204KIT	RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（基礎(chǔ)型）	48T
WLRE8205KIT	RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（熒光型）	48T
WLRN8206KIT	RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（膠體金試紙條型）	48T
WLB5001	DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（液體基礎(chǔ)型）	100T
WLN5002	DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（液體膠體金型）	100T
WLR5003	DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（液體熒光型）	100T
WLRB5001	RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（液體基礎(chǔ)型）	100T
WLRN5002	RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（液體膠體金型）	100T
WLRE5003	RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒（液體熒光型）	100T

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