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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

麥胚凝集素(WGA)是一種經(jīng)過(guò)充分研究的凝集素，已知其對(duì)N-乙酰-D-氨基葡萄糖和唾液酸的結(jié)合親和力，使其成為各種生物應(yīng)用中的有價(jià)值的工具。它與糖綴合物的相互作用使得WGA衍生物和綴合物能夠廣泛用于熒光成像和分析，便于標(biāo)記酵母芽疤痕、纖維化疤痕組織和革蘭氏細(xì)菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞膜。WGA特異性靶向被稱(chēng)為殼糊精的β-1，4-GlcNAc連接的殘基序列。每個(gè)單體包含兩個(gè)相同的、不相互作用的結(jié)合位點(diǎn)，與3或4個(gè)β-1，4-GlcNAc單元互補(bǔ)。在測(cè)試的單糖中，只有GlcNAc顯示出與WGA的強(qiáng)結(jié)合，而ManNAc顯示出無(wú)結(jié)合，而GalNAc顯示出弱結(jié)合。WGA的iFluor 532綴合物具有iFluor 532染料的明亮的紅色熒光特征(Ex/Em = 537/560 nm)。值得注意的是，與Alexa Fluor 532 WGA綴合物一樣，iFluor 532 WGA綴合物保留了其結(jié)合唾液酸和N-乙酰氨基葡萄糖殘基的能力，增強(qiáng)了其在熒光成像和各種科學(xué)研究分析中的效用。

產(chǎn)品性質(zhì)

Ex (nm)：537

Em (nm)：560

溶劑：Water

適用儀器

熒光顯微鏡  

Ex:                      Cy3/TRITC 濾波片組

Em：                   Cy3/TRITC 濾波片組

推薦孔板:                 黑色透明底板

儲(chǔ)備溶液配制

iFluor 532 小麥胚芽凝集素 (WGA) 綴合物儲(chǔ)備液 (200X)：將 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中，制成 2 mg/mL 的儲(chǔ)備溶液。

注意：重新配制的綴合物溶液可在 2-8 °C 下短期儲(chǔ)存，或在 -20 °C 下長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

工作溶液配制

iFluor 532小麥胚芽凝集素 (WGA) 綴合物工作溶液 (1X)：將 5 μL 200X WGA 儲(chǔ)備溶液添加到 1 mL HHBS 緩沖液中。

注意：不同細(xì)胞系的優(yōu)化染色濃度可能不同。 活細(xì)胞的推薦起始濃度為 5-10 µg/mL。

操作方案

活細(xì)胞染色

1. 用 HHBS 緩沖液清洗細(xì)胞兩次。

2. 添加 100 µL iFluor 532-WGA 工作溶液。

3. 將細(xì)胞與 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分鐘。

4. 用 HHBS 緩沖液清洗細(xì)胞兩次。

5. 使用 Cy3/TRITC 濾波片組在熒光顯微鏡上成像細(xì)胞。

固定細(xì)胞染色

1. 用含4%甲醛的PBS溶液固定細(xì)胞。

注意：對(duì)于固定細(xì)胞膜染色，建議在沒(méi)有透化步驟的情況下進(jìn)行染色。固定后透化步驟會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)區(qū)室染色，如高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng) (ER) 結(jié)構(gòu)染色。

2. 添加 100 µL iFluor 532-WGA 工作溶液。

3. 在室溫下，用 WGA 工作溶液孵育細(xì)胞 10-30 分鐘。

4. 用 HHBS 緩沖液清洗細(xì)胞兩次。

5. 使用 Cy3/TRITC 濾波片組在熒光顯微鏡上成像細(xì)胞。 

運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸。在零下15度以下保存, 避免光照。

注意事項(xiàng) ：

1、該產(chǎn)品不適用于革蘭氏陰性細(xì)菌。

2、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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