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產(chǎn)品簡介

麥胚凝集素(WGA)是一種與N-乙酰-D-氨基葡萄糖和唾液酸結(jié)合的凝集素。它是生物應(yīng)用中研究最多和最有用的凝集素。由于WGA與糖綴合物結(jié)合，其衍生物和綴合物被廣泛用于標(biāo)記細(xì)胞膜和纖維化疤痕組織，以進(jìn)行熒光成像和分析。WGA的碳水化合物結(jié)合特異性針對β-1，4-GlcNAc連接的殘基序列，即殼糊精。每個單體包含兩個相同的、不相互作用的結(jié)合位點，它們與3或4個β-1，4-GlcNAc單元互補。在檢測的單糖中，只有GlcNAc與WGA結(jié)合。ManNAc不結(jié)合，而GalNAc僅弱結(jié)合。WGA的iFluor 647綴合物顯示出iFluor 647染料明亮的紅色熒光。iFluor 647 WGA綴合物與AF647 WGA綴合物一樣結(jié)合唾液酸和N-乙酰氨基葡萄糖殘基。

產(chǎn)品性質(zhì)

Ex (nm)：656

Em (nm)：670

溶劑：Water

適用儀器

熒光顯微鏡  

Ex:                        Cy5 濾波片組

Em：                  Cy5 濾波片組

推薦孔板:                黑色透明底板

儲備溶液配制

iFluor 647 小麥胚芽凝集素 (WGA) 綴合物儲備液 (200X)：將 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中，制成 2 mg/mL 的儲備溶液。

注意：重新配制的綴合物溶液可在 2-8 °C 下短期儲存，或在 -20 °C 下長期儲存。

工作溶液配制

iFluor 647小麥胚芽凝集素 (WGA) 綴合物??工作溶液 (1X)：將 5 μL 200X WGA 儲備溶液添加到 1 mL HHBS 緩沖液中。

注意：不同細(xì)胞系的優(yōu)化染色濃度可能不同。 活細(xì)胞的推薦起始濃度為 5-10 µg/mL。

操作方案

活細(xì)胞染色

1. 用 HHBS 緩沖液清洗細(xì)胞兩次。

2. 添加 100 µL iFluor 647-WGA 工作溶液。

3. 將細(xì)胞與 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分鐘。

4. 用 HHBS 緩沖液清洗細(xì)胞兩次。

5. 使用 Cy5 濾波片組在熒光顯微鏡上成像細(xì)胞。

固定細(xì)胞染色

1. 用含4%甲醛的PBS溶液固定細(xì)胞。

注意：對于固定細(xì)胞膜染色，建議在沒有透化步驟的情況下進(jìn)行染色。固定后透化步驟會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)區(qū)室染色，如高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng) (ER) 結(jié)構(gòu)染色。

2. 添加 100 µL iFluor 647-WGA 工作溶液。

3. 在室溫下，用 WGA 工作溶液孵育細(xì)胞 10-30 分鐘。

4. 用 HHBS 緩沖液清洗細(xì)胞兩次。

5. 使用 Cy5 濾波片組在熒光顯微鏡上成像細(xì)胞。

運輸與保存方法

冰袋運輸。在零下15度以下保存, 避免光照。

注意事項 ：

1、該產(chǎn)品不適用于革蘭氏陰性細(xì)菌。

2、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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