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臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體

貨號(hào) YW066 售價(jià)(元) 12672
規(guī)格 1E+11 Particles CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

存儲(chǔ)

YW066

臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體

1E+11 Particles

-80℃

產(chǎn)品簡介

臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UC-MSCs)是一類來源于發(fā)育早期中胚層的多能干細(xì)胞,與其他來源的MSCs相比,來源于臍帶的MSCs具有采集方便、無倫理爭議、免疫原性低、自我更新快、倍增速度穩(wěn)定和增殖能力強(qiáng)等特點(diǎn)。此外,來源于臍帶的MSCs的外泌體攜帶多種傷口愈合的相關(guān)因子,能夠促進(jìn)成纖維細(xì)胞的遷移、增殖和膠原合成,因此臍帶MSCs外泌體被認(rèn)為是臨床細(xì)胞治療和再生醫(yī)學(xué)的首選。

該產(chǎn)品由臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)獲得的上清液分離純化得到的外泌體,可用于實(shí)驗(yàn)對照、直接進(jìn)行負(fù)載和靶向改造、組織修復(fù)等研究。

產(chǎn)品性質(zhì)

名稱

臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體

規(guī)格

1E+11 Particles/ml

外觀

白色粉末

pH

7

無菌檢測

無菌生長

總蛋白濃度

BCA)

純度

≥90%

儲(chǔ)存條件:-80 ℃,1年

案例展示

1:NTA檢測外泌體的粒徑分布和顆粒濃度:

將得到的外泌體震蕩分散均勻,用PBS稀釋至合適倍數(shù),標(biāo)記好樣本名稱、稀釋倍數(shù)、完成樣本的稀釋配制;測樣之前,先測試稀釋液:移液槍吸取200 μL稀釋液上機(jī)檢測,確認(rèn)組件、儀器都處于正常運(yùn)行;稀釋液測量完成,測試結(jié)果正常后開始測試樣本,取稀釋后的200 μL樣本上機(jī)檢測;待計(jì)數(shù)顆粒數(shù)達(dá)到100個(gè)以上時(shí)停止測試,導(dǎo)出數(shù)據(jù)結(jié)果,完成樣本檢測。

 

2:TEM觀察外泌體的形態(tài):

重懸外泌體至50-100 μL 2% PFA中,將5 μL混合懸液加到Formvar-carbon載樣銅網(wǎng)上;也可將5-10 μL混合懸液滴加到封口膜上,將銅網(wǎng)Formvar膜面朝下放在懸液上。每個(gè)樣品準(zhǔn)備2-3個(gè)銅網(wǎng);將100 μL PBS加到封口膜上。用鑷子將銅網(wǎng) (Formvar膜面朝下) 放在PBS液滴上清洗(在所有步驟中,都應(yīng)保持Formvar膜面濕潤,而另一面干燥);將銅網(wǎng)放在50 μL 1%戊二醛液滴上5 min;將銅網(wǎng)放在100 μL ddH2O洗滌8次,每次洗2 min;將銅網(wǎng)放在50 μL草酸雙氧鈾液滴上(pH 7.0),5 min;將銅網(wǎng)放在50甲基纖維素液滴上10 min,冰上操作;銅網(wǎng)放到樣品臺(tái)頂端的不銹鋼環(huán)上,用濾紙吸去多余液體;空氣中干燥5-10 min;將銅網(wǎng)放在樣品盒內(nèi),80 kV下拍攝電鏡照片。

3:Western Blot檢測外泌體標(biāo)志物(三陽一陰):

將分離純化得到的外泌體加入裂解液,裂解后吸取上清液,根據(jù)測定蛋白濃度稀釋樣本至合適濃度;裂解液加入4×LDS上樣緩沖液(B0007,Invitrogen),95 ℃煮5 min,待降至室溫后,瞬離;加樣:將15 μL樣本全部加到泳道中,并在樣本首尾加上marker;電泳:190 V,70 min;提前10 min用甲醇活化PVDF膜;轉(zhuǎn)膜:轉(zhuǎn)膜液需要提前預(yù)冷,275 mA,70 min;封閉:配置1% BSA的TBST溶液,室溫封閉1 h;孵育一抗:4 ℃,搖床上過夜,抗體用1% BSA的TBST溶液稀釋;洗膜:1×TBST洗三次,10 min/次;孵育二抗:抗體用1% BSA的TBST溶液稀釋,室溫?fù)u床1 h;洗膜:1×TBST洗三次,10 min/次;曝光拍照。

注意事項(xiàng)

本品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究使用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品。

 

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