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肝酯酶（HL）檢測(cè)試劑盒（微量法100T/48S）
| 貨號(hào) | SH0481 | 售價(jià)（元） | 1620 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0481 |
肝酯酶（HL）檢測(cè)試劑盒（微量法100T/48S） |
100T/48S |
測(cè)定意義：
肝酯酶是脂肪分解酶，在肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞中合成，存在于肝臟竇周間隙內(nèi)皮細(xì)胞表面和竇周間隙腔面的肝細(xì)胞微絨毛表面，可促進(jìn)脂蛋白中的膽固醇向類固醇激素轉(zhuǎn)化，血漿中的HL活性增高 時(shí)，血漿中小顆?？蓪?dǎo)致LDL水平升高，加速動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。
測(cè)定原理：
肝酯酶水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生α-萘酚，可與固藍(lán)B鹽形成紫紅色偶氮化合物，在595nm有特征吸收峰，顏色深淺在一定范圍內(nèi)與肝酯酶活性成正相關(guān)。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0481-100T/48S |
Storage |
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試劑一：液體 |
110ml |
4℃ |
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試劑二：液體 |
1ml |
4℃避光 |
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試劑三：液體 |
8ml |
4℃ |
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試劑四：液體 |
1ml |
4℃避光 |
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說明書 |
一份 |
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自備儀器和用品：
天平、冷凍離心機(jī)、研缽、水浴鍋、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板。
樣品處理：
1. 組織：按照質(zhì)量（g）：試劑一體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1ml試劑一）加入試劑一，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心10min，取上清待測(cè)。
2. 細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml試劑一）加入試劑一，冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后于4℃，10000g離心10min，取上清待測(cè)。
3. 血清：直接測(cè)定。
測(cè)定操作：
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對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
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樣品（μl） |
20 |
20 |
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試劑一（μl） |
90 |
80 |
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試劑二（μl） |
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10 |
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混勻，30℃水浴10min |
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試劑三（μl） |
80 |
80 |
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試劑四（μl） |
10 |
10 |
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充分混勻，30℃靜置5min，于微量石英比色皿/96孔板，測(cè)定595nm處吸光值，記為A對(duì)照管和A測(cè)定管，△A=A測(cè)定管- A對(duì)照管 |
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計(jì)算公式：
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y= 0.1519 x -0.1241，R2=0.9994
1．按照蛋白濃度計(jì)算
酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個(gè)酶活力單位。
HL活性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.1241）÷0.1519×V反總÷（V樣×Cpr）÷T
= 6.58×（△A+0.1241）÷Cpr
2．按照樣本質(zhì)量計(jì)算
酶活性定義：每克組織每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個(gè)酶活力單位。
HL活性（μmol /min/g 鮮重）= （△A+0.1241）÷0.1519×V反總÷（W×V樣÷V樣總）÷T
= 6.58×（△A+0.1241）÷W
3．按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
酶活性定義：每104個(gè)細(xì)胞每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個(gè)酶活力單位。
HL活性（μmol /min/104 cell）= （△A+0.1241）÷0.1519×V反總÷（V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總）÷T
= 6.58×（△A+0.1241）÷細(xì)胞數(shù)量
4．按照液體體積計(jì)算
酶活性定義：每毫升血清每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個(gè)酶活力單位。HL活性（μmol /min/ml）=（△A+0.1241）÷0.1519×V反總÷V樣÷T
= 6.58×（△A+0.1241）
V反總：反應(yīng)總體積，0.2ml；V樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.02ml；W：樣本質(zhì)量，g；V樣總：加入提取液體積，1ml；T：反應(yīng)時(shí)間，10min
b．用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y= 0.076 x -0.1241，R2=0.9994
1．按照蛋白濃度計(jì)算
酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個(gè)酶活力單位。
HL活性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.1241）÷0.076×V反總÷（V樣×Cpr）÷T
= 13.16×（△A+0.1241）÷Cpr
2．按照樣本質(zhì)量計(jì)算
酶活性定義：每克組織每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個(gè)酶活力單位。
HL活性（μmol /min/g 鮮重）= （△A+0.1241）÷0.076×V反總÷（W×V樣÷V樣總）÷T
= 13.16×（△A+0.1241）÷W
3．按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
酶活性定義：每104個(gè)細(xì)胞每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個(gè)酶活力單位。
HL活性（μmol /min/104 cell）= （△A+0.1241）÷0.076×V反總÷（V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總）÷T
= 13.16×（△A+0.1241）÷細(xì)胞數(shù)量
4．按照液體體積計(jì)算
酶活性定義：每毫升血清每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個(gè)酶活力單位。HL活性（μmol /min/ml）=（△A+0.1241）÷0.076×V反總÷V樣÷T
= 13.16×（△A+0.1241）
V反總：反應(yīng)總體積，0.2ml；V樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.02ml；W：樣本質(zhì)量，g；V樣總：加入提取液體積，1ml；T：反應(yīng)時(shí)間，10min