游離膽固醇含量測定試劑盒（微量法100T/96S）
| 貨號 | SH0473 | 售價（元） | 460 |
| 規(guī)格 | 100T/96S | CAS號 |
- 產品簡介
- 相關產品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0473 |
游離膽固醇（free cholesterol, FC）含量測定試劑盒（微量法100T/96S） |
100T/96S |
測定意義：
FC是構成細胞膜的主要成分，也是合成腎上腺皮質激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標。
測定原理：
FC氧化酶催化FC生成△4-膽甾烯酮和H2O2，過氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成紅色醌類化合物，在500nm有吸收峰，其顏色深淺與FC含量成正比。
組成：
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產品名稱 |
SH0473-100T/96S |
Storage |
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試劑一：異丙醇（自備） |
100ml |
-- |
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試劑二：液體 |
20ml |
4℃ |
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試劑三：粉劑 |
1瓶 |
4℃ |
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試劑四：液體 |
40μl |
4℃ |
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TC標準品：液體 |
1ml |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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TC標準品：液體1ml×1支，0.5μmol/ml，4℃保存。
自備儀器和用品：
水浴鍋、可調式移液槍、酶標儀、96孔板、異丙醇和蒸餾水。
FC的提?。?/span>
1. 組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml試劑一）進行冰浴勻漿。8000g，4℃離心10min，取上清置冰上待測。
2．細菌、真菌：先收集400-500萬細胞或細菌到離心管內，棄上清，加1ml試劑一，超聲波破碎1min（強度20％，超聲2s，停1s），即FC待測液。
3．血清（漿）樣品：直接測定。
測定操作：
1. 酶標儀預熱30 min，調節(jié)波長到500 nm。
2. FC工作液的配制：臨用前，吸取約0.8ml試劑二分別加入試劑三和試劑四瓶中，充分溶解后再全部轉移回試劑二瓶中，充分混勻，FC工作液置于37℃水浴10min。用不完的工作液4℃保存一周。
3. 標準管：依次在96孔板中加入20μl FC標準液和180μl FC工作液，混勻，37℃靜置3h后于500nm測定A標準管。
4. 測定管：依次在96孔板中加入20μl FC待測液和180μl FC工作液，混勻，37℃靜置3h后于500nm測定A測定管。
5、空白管：依次在96孔板中加入20μl 試劑一和180μl FC工作液，混勻，37℃靜置3h后于500nm測定A測定管。
注意事項：
1、 標準管和空白管只要做一管。
2、 若測定管產生白色渾濁，可以將待測液用異丙醇稀釋2~5倍后測定，并在最后結果乘以相應倍數(shù)。
計算公式：
1. 血清（漿）中FC含量計算：
FC含量（μmol /dL）= C標準液×（A測定管-A空白管）÷（A標準管-A空白管）×100ml
=50×（A測定管-A空白管）÷（A標準管-A空白管）
C標準液：0.5μmol/ml；100 ml：1dL=100 ml。
2. 組織中FC含量計算：
(1)按樣本蛋白濃度計算
FC含量（μmol / mg prot）= C標準液×（A測定管-A空白管）÷（A標準管-A空白管）÷Cpr
= 0.5×（A測定管-A空白管）÷（A標準管-A空白管）÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
FC含量（μmol / g 鮮重）= C標準液×（A測定管-A空白管）÷（A標準管-A空白管）÷W
= 0.5×（A測定管-A空白管）÷（A標準管-A空白管）÷W
C標準液：0.5μmol/ml；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml；W：樣本質量，g/ml
3. 細胞、細菌中FC含量計算：
FC含量（μmol /104 cell）= C標準液×（A測定管-A空白管）÷（A標準管-A空白管）÷細菌或細胞（104 cell /L）
=0.5×（A測定管-A空白管）÷（A標準管-A空白管）÷細菌或細胞（104 cell /L）
C標準液：0.5μmol/ml。
最低檢出限為1nmol/ml。