?；D(zhuǎn)移酶（AAT）檢測(cè)試劑盒（分光光度法25T/24S）

貨號(hào)	SH0460	售價(jià)（元）	2400
規(guī)格	25T/24S	CAS號(hào)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介
相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)	名稱	規(guī)格
SH0459	酰基轉(zhuǎn)移酶（AAT）檢測(cè)試劑盒（分光光度法50T/48S）	50T/48S
SH0460	?；D(zhuǎn)移酶（AAT）檢測(cè)試劑盒（分光光度法25T/24S）	25T/24S

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義：

AAT是一個(gè)多功能蛋白大家族，主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種?；腿ヵ；磻?yīng)，在基因表達(dá)、代謝和信號(hào)傳導(dǎo)中具有重要作用。

測(cè)定原理：

AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙酰基到丁醇，釋放的CoA還原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰，測(cè)定412 nm吸光度增加速率可計(jì)算AAT活性。

組成：

產(chǎn)品名稱	SH0460-25T/24S		SH0459-50T/48S	Storage
提取液：液體	25ml		50ml	4℃
試劑一：液體	25ml		50ml	4℃
試劑二：粉劑	1瓶		1瓶	-20℃
試劑三：粉劑	1支		1瓶	4℃避光
說(shuō)明書		一份

自備儀器和用品：

研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1ml玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、無(wú)水乙醇。

粗酶液提?。?/span>

1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液）進(jìn)行冰浴勻漿。8000g，4℃離心10min，取上清置冰上待測(cè)。

2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（10⁴個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。

3. 液體：直接檢測(cè)。

SH0460-25T/24S-AAT測(cè)定操作：

1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到412 nm，蒸餾水調(diào)零。

2、工作液的配制：臨用前在試劑二瓶中加入22.5mL試劑一，充分混勻待用。用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。

3、試劑三的配制：臨用前加無(wú)水乙醇1.25mL充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存。

4、空白管：在Ep管或96孔板中加入50μl提取液和900μL工作液，充分混勻，35℃反應(yīng)15min，加入50μL試劑三，充分混勻，25℃靜置10min，測(cè)定412nm處吸光值，記為A空白管。

5、 測(cè)定管：在Ep管或96孔板中加入50μl樣本和900μL工作液，充分混勻，35℃反應(yīng)15min，加入50μL試劑三，充分混勻，25℃靜置10min，測(cè)定412nm處吸光值，記為A測(cè)定管?！?/span>A=A測(cè)定管- A空白管，空白管只要做一管。