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高鐵還原酶（FCR）檢測試劑盒（微量法 100T/96S）
| 貨號 | SH0420 | 售價(jià)（元） | 1920 |
| 規(guī)格 | 100T/96S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0420 |
高鐵還原酶（FCR）檢測試劑盒（微量法 100T/96S） |
100管/96樣 |
測定意義：
高鐵還原酶（ferric-chelate reductase, FCR）催化高價(jià)鐵螯合物中的Fe3+還原為Fe2+，在部分物種鐵元素的吸收中有重要作用。
測定原理：
FCR催化Fe3+還原為Fe2+，Fe2+和ferrozine反應(yīng)顯色，在562nm下有特征吸光值。
試劑組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0420-100T/96S |
Storage |
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試劑一：液體 |
6ml |
4℃避光 |
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試劑二：液體 |
6ml |
4℃避光 |
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試劑三：液體 |
6ml |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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需自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
粗酶液提?。?/span>
按照組織質(zhì)量（g）：水（ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml蒸餾水），進(jìn)行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
測定步驟：
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至562nm，蒸餾水調(diào)零。
2、工作液配制：將試劑一、二、三以1:1:1的比例混合。臨用前配制，用多少配多少。
在微量石英比色皿/96孔板中，加入50μl樣本上清和150μl工作液，混勻，記錄初始吸光值A1和30min后的吸光值A2。ΔA=A2-A1。
FCR活性計(jì)算：
a.用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 8.0014x + 0.0011，R2 = 0.9997；
按樣本質(zhì)量計(jì)算
單位定義：每g樣本每分鐘產(chǎn)生1nmolFe2+-ferrozine定義為一個(gè)酶活力單位。
FCR（nmol/min/g 鮮重）=（△A-0.0011）÷ 8.0014×1000×V標(biāo)÷(V樣÷V樣總×W)÷T = 4.166×（△A-0.0011）÷W
按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位定義：每mg蛋白每分鐘產(chǎn)生1nmolFe2+-ferrozine定義為一個(gè)酶活力單位。
FCR（nmol/min/mg prot）=（△A-0.0011）÷8.0014×1000×V標(biāo)÷(V樣÷V樣總×Cpr)÷T=4.166×（△A-0.0011）÷Cpr
V樣總：加入提取液體積，1 ml；V樣：反應(yīng)中樣品體積，50μl；V標(biāo)：加入標(biāo)準(zhǔn)品體積 ，50μl；T：反應(yīng)時(shí)間，30min；W：樣品質(zhì)量，g；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml；1000，μmol到nmol的轉(zhuǎn)換系數(shù)。
b.用96孔板測定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 4.0007x + 0.0011，R2 = 0.9997；y，吸光度
按樣本質(zhì)量計(jì)算
單位定義：每g樣本每分鐘產(chǎn)生1nmolFe2+-ferrozine定義為一個(gè)酶活力單位。
FCR（nmol/min/g 鮮重）=（△A-0.0011）÷4.0007×1000×V標(biāo)÷(V樣÷V樣總×W)÷T=8.331×（△A-0.0011）÷W
按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位定義：每mg蛋白每分鐘產(chǎn)生1nmolFe2+-ferrozine定義為一個(gè)酶活力單位。
FCR（nmol/min/mg prot）=（△A-0.0011）÷4.0007×1000×V標(biāo)÷(V樣÷V樣總×W)÷T =8.331×（△A-0.0011）÷Cpr
V樣總：加入提取液體積，1 ml；V樣：反應(yīng)中樣品體積，50μl；V標(biāo)：加入標(biāo)準(zhǔn)品體積 ，50μl；T：反應(yīng)時(shí)間，30min；W：樣品質(zhì)量，g；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml；1000，μmol到nmol的轉(zhuǎn)換系數(shù)。