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土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)檢測試劑盒(微量法100T/48S)

貨號 SH0406 售價(元) 2160
規(guī)格 100T/48S CAS號
  • 產品簡介
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貨號

名稱

規(guī)格

SH0406

土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)檢測試劑盒(微量法100T/48S)

100T/48S

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義:

β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細菌和真菌等生物體,是催化木聚糖類半纖維素降解的關鍵酶,產物木糖可作為碳源應用于微生物發(fā)酵。另外,β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應用于造紙工業(yè),比傳統(tǒng)的漂白法環(huán)保,具有廣泛的應用價值。

測定原理:

S-β-XYS催化對硝基苯酚-β-D-木糖苷產生對硝基苯酚,對硝基苯酚在405nm處有特征吸收峰,測定405nm光吸收增加速率,可計算S-β-XYS活性。

組成:

產品名稱

SH0406-100T/48S

Storage

提取液:液體

100ml

4℃

試劑一:液體

1ml

4℃避光

試劑二:液體

10ml

4℃

試劑三:液體

10ml

4℃

說明書

一份

自備儀器和用品:

天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

粗酶液提取

0.1g鮮土或風干土樣,加入1ml提取液進行冰浴勻漿,室溫振蕩提取30min,然后10000g,4℃,離心10min,取上清待測。

測定操作表:

1、 分光光度計/酶標儀預熱30min,調節(jié)波長至405nm。

2、 操作表

 

對照管

測定管

樣本(μl

40

40

試劑一(μl

 

10

試劑二(μl

80

70

混勻,45℃水浴20min

試劑三(μl

80

80

混勻,靜置5min,405nm處測定吸光值A計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管設一個對照管。

β-木糖苷酶活性計算公式:

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準曲線:y=13.226x+0.0011R2=0.9998;x為標準品濃度(μmol/ml),y為吸光值ΔA。

酶活定義:每克土樣每天催化產生1μmol對硝基苯酚的酶量為一個酶活單位。

β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土樣)=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反總÷(V÷V樣總×W)÷T

=16.33×(ΔA-0.0011)÷W

V樣總:加入提取液體積,1ml; V反總:反應總體積,0.12ml;V樣:反應中樣品體積,0.04ml; W:樣品質量,g;T:反應時間,20min=1/72d;

b.96孔板測定的計算公式如下

標準曲線:y=6.613x+0.0011,R2=0.9998;x為標準品濃度(μmol/ml),y為吸光值ΔA

酶活定義:每克土樣每天催化產生1μmol對硝基苯酚的酶量為一個酶活單位。

β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土樣)=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V反總÷(V÷V樣總×W)÷T

=32.66×(ΔA-0.0011)÷W

V樣總:加入提取液體積,1ml; V反總:反應總體積,0.12ml;V樣:反應中樣品體積,0.04ml; W:樣品質量,gT:反應時間,20min=1/72d

 

ΔA控制在0.01-1范圍內,若ΔA大于1,可適當減小樣本量。

標準曲線線性范圍為:0.01μmol/ml-0.5μmol/ml。

 

 

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