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土壤植酸酶(phytase)檢測(cè)試劑盒(微量法100T/48S)
貨號(hào) | SH0404 | 售價(jià)(元) | 1200 |
規(guī)格 | 100T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
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貨號(hào) |
名稱(chēng) |
規(guī)格 |
SH0404 |
土壤植酸酶(phytase)檢測(cè)試劑盒(微量法100T/48S) |
100T/48S |
測(cè)定意義:
植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類(lèi)水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類(lèi)酶的總稱(chēng),屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對(duì)環(huán)境的污染,改善營(yíng)養(yǎng)成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價(jià)值。
測(cè)定原理:
植酸酶在一定溫度和pH值條件下,水解底物植酸鈉生成無(wú)機(jī)磷與肌醇衍生物,無(wú)機(jī)磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨顯色劑反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物,在700nm處有特征吸收峰,根據(jù)700nm處吸光值變化可計(jì)算得植酸酶活性。
組成:
產(chǎn)品名稱(chēng) |
SH0404-100T/48S |
Storage |
緩沖液:液體 |
60ml |
4℃ |
試劑一:粉劑 |
1瓶 |
4℃避光 |
試劑二:液體 |
15ml |
4℃ |
顯色劑:粉劑 |
6管 |
4℃避光 |
說(shuō)明書(shū) |
一份 |
試劑一:粉劑×1瓶,4℃避光保存,臨用前加緩沖液30ml配制,現(xiàn)用現(xiàn)配;用不完的試劑4℃保存一個(gè)月。
顯色劑:粉劑×6管,4℃避光保存,臨用前根據(jù)用量每瓶加0.4ml雙蒸水溶解,再加1.6ml試劑二混勻。
自備儀器和用品:
天平、低溫離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔板、恒溫水浴鍋,甲苯(不允許快遞)。
樣本處理:
新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干,過(guò)30~50目篩。
測(cè)定操作表:
|
對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
樣本(g) |
0.03 |
0.03 |
甲苯 |
20 |
20 |
振蕩混勻,室溫放置15min |
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緩沖液(μl) |
500 |
|
試劑一(μl) |
|
500 |
混勻,37℃孵育24h,10000g,4℃離心5min,取上清 |
||
上清 |
100 |
100 |
顯色劑(μl) |
100 |
100 |
混勻,靜置15min,測(cè)定700nm處吸光值,△A=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。 |
酶活性計(jì)算公式:
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn):y = 0.8795x + 0.0084,R2 = 0.9977;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μmol/ml),y為吸光值△A。
酶活性定義:在37℃,pH5.5的條件下,每克土樣每小時(shí)從5mmol/L的植酸鈉溶液中釋放出1μmol的無(wú)機(jī)磷為一個(gè)酶活力單位。
植酸酶活性(μmol/h /g 土樣)=(△A-0.0084)÷0.8795×V反總÷W÷T
=0.82×(△A-0.0084)
V反總:反應(yīng)總體積,0.52ml;T:反應(yīng)時(shí)間,24h;W:樣本質(zhì)量,0.03g。
注意事項(xiàng):
1、顯色劑需要臨用前根據(jù)用量配制,每一瓶是10個(gè)樣本的用量,新配制的顯色劑若有顏色則已經(jīng)污染或者試劑過(guò)期,應(yīng)放棄使用。
2、ΔA線(xiàn)性范圍為0.01-0.5。