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土壤酸性木聚糖酶(S-ACX)測定試劑盒(分光光度法50T/24S)

貨號(hào) SH0399 售價(jià)(元) 540
規(guī)格 50T/24S CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

SH0399

土壤酸性木聚糖酶(S-ACX)測定試劑盒(分光光度法50T/24S)

50管/24樣

正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生,能催化水解木聚糖,也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶,可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖,降低釀造中物料的粘度,促進(jìn)有效物質(zhì)的釋放,以及降低飼料中的非淀粉多糖,促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用,因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中,ACX一般分離自耐酸的真菌,細(xì)菌及部分霉菌。

測定原理:

ACX在酸性環(huán)境下能將木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,進(jìn)一步在沸水浴條件下與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng),在540nm處有特征吸收峰,反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比,通過測定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率,可計(jì)算ACX活力。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0399-50T/24S

Storage

緩沖液:液體

20ml

4℃

試劑一:液體

5ml

4℃避光

試劑二:液體

25ml

4℃避光

說明書

一份

 

試劑三:粉劑×1 瓶,-20 保存,用時(shí)加入 4ml 蒸餾水,混勻,用不完的試劑 4保存一周;

試劑四:粉劑×1 瓶,4 保存,用時(shí)加入 4ml 蒸餾水,混勻,用不完的試劑 4保存一周;

自備儀器和用品:

天平、常溫離心機(jī)、震蕩儀、恒溫水浴鍋,可見分光光度計(jì)、1 ml玻璃比色皿。

樣品處理:

新鮮土樣風(fēng)干,過30-50目篩。

測定操作表:

 

對(duì)照管

測定管

土樣(g

0.1

0.1

緩沖液(μl

600

400

試劑一(μl

 

200

混勻,50℃震蕩反應(yīng)30min,立即90℃水浴10min,8000g,25℃離心10min,取上清500μl

試劑二(μl

500

500

混勻,90水浴中顯色5min1ml玻璃比色皿,對(duì)照管調(diào)零,測定A540

S-ACX計(jì)算公式

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 2.5554x - 0.002 ,R2 = 0.9983

酶活定義:50℃pH4.8條件下,每克土壤每天分解木聚糖產(chǎn)生1μmol 還原糖所需的酶量為一個(gè)酶活單位。

S-ACX活力(μmol/d/g 土樣)=A540+0.002÷ 2.5554×V反總×103÷ W÷T÷ 150

                      = 75.14×A540+0.002÷ W

V反總:反應(yīng)總體積,0.6ml;T:反應(yīng)時(shí)間,1/48d;10001mmol/L =103μmol/L;150:木糖分子量。

注意事項(xiàng):

1. 保證震蕩反應(yīng)30min,使酶與底物充分接觸。

2. 注意90℃水浴防止爆開,以免改變反應(yīng)體系。