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土壤錳過氧化物酶檢測試劑盒(微量法100T/48S)

貨號 SH0372 售價(元) 1320
規(guī)格 100T/48S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0372

土壤錳過氧化物酶(Soil manganese peroxidase,S-Mnp)試劑盒(微量法100T/48S)

100T/48S

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義:

錳過氧化物酶(EC1.11.1.13)是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶,主要存在于擔子菌中,屬于木質(zhì)素降解酶系,能有效的降解木質(zhì)素及廢水和土壤中比較難降解的氯化物,疊氮化合物、DTT,多環(huán)芳烴等。

測定原理:

錳過氧化物酶在Mn2+存在的條件下,將愈創(chuàng)木酚氧化為四鄰甲氧基連酚,在465nm有特征吸收峰。

試劑組成和配制

產(chǎn)品名稱

SH0372-100T/48S

Storage

試劑一:液體

12ml

4℃

試劑二:液體

2ml

4℃

試劑三:液體

4ml

4℃避光

試劑液體

2ml

4℃

說明書

一份

自備儀器和用品:

天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀、甲苯

樣品處理:

新鮮土樣風干,過30-50目篩。

測定步驟:

 

對照管

測定管

土樣(mg

40

40

甲苯(μl

30

30

25℃,靜置15min

試劑一(μl

140

120

試劑二(μl

 

20

試劑三(μl

40

40

試劑四(μl

20

20

充分混勻,于30℃震蕩反應3h,于10000rpm4℃離心10min,取150μl于微量石英比色皿/96孔板,測定465nm處吸光值,記為A對照管和A測定管,△A=A測定管- A對照管

酶活計算公式

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

酶活性定義每克土壤每天氧化1nmol愈創(chuàng)木酚所需的酶量為一個酶活力單位。

S-MnP活性(nmol/d /g 土樣)= ×V反總÷W÷T= 66.4×△A÷W

ε:愈創(chuàng)木酚摩爾消光系數(shù):12100L/mol/cm;d:比色皿光徑,1cmV反總:反應總體積,0.2ml;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應時間,3h

b. 96孔板測定的計算公式如下

酶活性定義每克土壤每天氧化1nmol愈創(chuàng)木酚所需的酶量為一個酶活力單位。

S-MnP活性(nmol/d /g土樣)= ×V反總÷W÷T= 132.8×△A÷W

ε:愈創(chuàng)木酚摩爾消光系數(shù):12100L/mol/cm;d:比色皿光徑,0.5cmV反總:反應總體積,0.2ml;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應時間,3h