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土壤脂肪酶(S-LPS)檢測試劑盒(分光光度法50T/48S)
貨號 | SH0345 | 售價(元) | 540 |
規(guī)格 | 50T/48S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
SH0345 |
土壤脂肪酶(S-LPS)檢測試劑盒(分光光度法50T/48S) |
50管/48樣 |
測定意義:
LPS又稱甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯)。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中LPS的異常增高常見于胰腺炎和胰腺癌。
測定原理:
LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用銅皂法測定脂肪酸生成速率,即可計算LPS活性。
試劑組成和配制:
產(chǎn)品名稱 |
SH0345-50T/48S |
Storage |
試劑一:液體 |
90ml |
4℃ |
試劑二:粉劑 |
14ml |
4℃ |
試劑三:甲苯 |
100ml(自備) |
4℃ |
試劑四:粉劑 |
20ml |
4℃ |
標準品:液體 |
10μl |
4℃ |
說明書 |
一份 |
試劑二:液體14ml×1瓶,4℃保存。每次使用前用震蕩混勻器劇烈震蕩20min;
標準品:液體10μl×1瓶,10 μmol/ml的標準溶液,4℃保存。臨用前加入3.168 ml甲苯,充分溶解。
自備儀器和用品:
研缽、臺式離心機、震蕩混勻器、可見分光光度計、1ml玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、甲苯100ml、冰和蒸餾水。
樣本處理:
建議稱取約0.1g土樣,加入1ml試劑一進行冰浴勻漿,再用回旋式振蕩器振蕩提取15min,4℃,4000g離心10min,取上清待測。
S-LPS測定操作:
1、分光光度計預熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長到710 nm,蒸餾水調(diào)零。
2、試劑一和試劑二置于37℃水浴預熱30min以上。
3、在5ml EP管中依次加入下列試劑:
試劑名稱(μl) |
空白管 |
測定管 |
蒸餾水 |
375 |
|
樣本 |
|
125 |
試劑一 |
750 |
750 |
試劑二 |
|
250 |
37℃振蕩反應10 min;
試劑三 |
2000 |
2000 |
37℃振蕩反應10 min后,8000g,25℃,離心10min,取上清液
試劑名稱(μl) |
空白管 |
測定管 |
標準管 |
上清液 |
1200 |
1200 |
|
標準品 |
|
|
1200 |
試劑四 |
300 |
300 |
300 |
37℃振蕩反應5 min后,靜置5min,取800μl上層液加入1 ml玻璃比色皿,于710nm處測定吸光值。
注意事項:
空白管和標準管只需測定一次。
S-LPS活性計算公式:
活性單位定義:37℃中每克土樣每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個酶活單位。
S-LPS (μmol/min/g 土樣) = [C標準品×(A測定管-A空白管)÷(A標準管- A空白管)]×V反總÷(W×V樣÷V樣總)÷T
=16×[(A測定管-A空白管)÷(A標準管- A空白管)]÷W
C標準品:10 μmol/ml;V反總:反應總體積,2ml;V樣:反應中加入樣本體積,0.125ml;V樣總:加入提取液體積,1ml;W:樣本質(zhì)量,g;T:催化反應時間,10 min。