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土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶(S-C1)檢測試劑盒(分光光度法50T/24S)
貨號 | SH0343 | 售價(元) | 840 |
規(guī)格 | 50T/24S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
SH0343 |
土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶(S-C1)檢測試劑盒(分光光度法50T/24S) |
50管/24樣 |
測定意義:
C1(EC3.2.1.91)存在于細(xì)菌、真菌和動物體內(nèi),是纖維素酶系的組份之一,C1催化多聚糖鏈的末端非還原端釋放出纖維二糖和葡萄糖。
測定原理:
采用3,5-二硝基水楊酸法測定C1催化微晶纖維素降解產(chǎn)生的還原糖的含量。
試劑的組成和配制:
產(chǎn)品名稱 |
SH0343-50T/24S |
Storage |
提取液:液體 |
50ml |
4℃ |
試劑一:液體 |
15ml |
4℃ |
試劑二:液體 |
60ml |
4℃ |
說明書 |
一份 |
自備儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
樣品測定的準(zhǔn)備:
稱取約0.1g新鮮土樣或風(fēng)干土樣,加入1ml提取液,進(jìn)行冰浴勻漿,室溫振蕩提取30min,然后10000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
測定步驟:
1、分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至540nm,蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表(在EP管中依次加入下列試劑):
試劑名稱(μl) |
測定管 |
對照管 |
樣本 |
50 |
50 |
試劑一 |
500 |
|
蒸餾水 |
|
500 |
混勻,37℃準(zhǔn)確水浴2h
試劑二 |
1000 |
1000 |
混勻, 90℃水浴10min(蓋緊,防止水分散失),冷卻后,測540nm下吸光值A,計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管需設(shè)一個對照管。
S-C1活性計算:
標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 6.4078x - 0.0673;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml),y為吸光值。
單位的定義:每g土樣每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。
S-C1活力(μg /min /g鮮重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反總]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W
1000:1mg/ml=1000ug/ml;V反總:反應(yīng)體系總體積,0.55ml; V樣:加入樣本體積,0.05 ml;V樣總:加入提取液體積,1 ml;T:反應(yīng)時間,120 min;W:樣本質(zhì)量,g。