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土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)檢測(cè)試劑盒(50T/24S)
貨號(hào) | SH0341 | 售價(jià)(元) | 960 |
規(guī)格 | 50T/24S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
SH0341 |
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)檢測(cè)試劑盒( 分光光度法50T/24S) |
50管/24樣 |
測(cè)定意義:
S-LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性變化與機(jī)體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。
測(cè)定原理:
S-LAP分解L-亮氨酰對(duì)硝基苯胺生成對(duì)硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通過測(cè)定吸光值升高速率來計(jì)算S-LAP活性。
試劑的組成和配制:
產(chǎn)品名稱 |
SH0341-50T/24S |
Storage |
試劑一:液體 |
65ml |
4℃ |
試劑二:粉劑 |
1瓶 |
-20℃ |
說明書 |
一份 |
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿和蒸餾水。
S-LAP測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至405nm,蒸餾水調(diào)零。
2、在試劑二瓶中加入30ml試劑一充分溶解(如較難溶解,可60℃水浴加熱約30min促進(jìn)溶解);用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
3、操作表:
試劑名稱 |
對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
新鮮土樣(g) |
0.2 |
0.2 |
試劑一(μl) |
1200 |
|
試劑二(μl) |
|
1200 |
混勻, 37℃振蕩反應(yīng)1h后,8000g 4℃離心10min,取1ml上清液于比色皿中,405nm處測(cè)定吸光值A,計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
S-LAP活力單位的計(jì)算:
用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
單位的定義:每天每g土樣每天生成1 μmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
S-LAP(μmol/d /g 土樣)=ΔA×V反總÷(ε×d)×106÷W÷T=14.8×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,1.2×10-3 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;T:反應(yīng)時(shí)間,1h=1/24d; W:樣本質(zhì)量,0.2g。