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土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)檢測(cè)試劑盒(50T/24S)
貨號(hào) | SH0339 | 售價(jià)(元) | 840 |
規(guī)格 | 50T/24S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
SH0339 |
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)檢測(cè)試劑盒(分光光度法50T/24S) |
50管/24樣 |
測(cè)定意義:
S-NAG是溶酶體中的一種酸性水解酶,由土壤微生物分泌。S-NAG活性變化與機(jī)體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。
測(cè)定原理:
S-NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成對(duì)-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通過測(cè)定吸光值升高速率來計(jì)算NAG活性。
試劑組成和配制:
產(chǎn)品名稱 |
SH0339-50T/24S |
Storage |
試劑一:甲苯 |
5ml(自備) |
4℃ |
試劑二:粉劑 |
2瓶 |
-20℃ |
試劑三:液體 |
25ml |
4℃ |
試劑四:液體 |
50ml |
4℃ |
說明書 |
一份 |
試劑二:粉劑×2瓶,-20℃保存;臨用前每瓶加入6ml蒸餾水,充分溶解備用,用不完的試劑仍-20℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
樣品處理:
新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。
測(cè)定步驟:
試劑名稱 |
測(cè)定管 |
對(duì)照管 |
風(fēng)干土樣(g) |
0.05 |
0.05 |
試劑一(μl) |
25 |
25 |
|
室溫振蕩混勻15min |
90℃振蕩混勻15min |
試劑二(μl) |
400 |
|
蒸餾水(μl) |
|
400 |
試劑三(μl) |
500 |
500 |
混勻, 37℃振蕩反應(yīng)1h后,立即90℃水浴5min(蓋緊,防止水分散失),流水冷卻10000g 25℃離心10min,取上清液。
上清液(μl) |
500 |
500 |
試劑四(μl) |
1000 |
1000 |
充分混勻,室溫靜置2min后,400nm處蒸餾水調(diào)零,測(cè)定吸光值A,計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
S-NAG活力計(jì)算:
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.00645x -0.0054;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μmol/L),y為吸光值。
單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1 μmol對(duì)-硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。
S-NAG活力(μmol/d/g 土樣)= (ΔA+0.0054) ÷0.00645×V反總÷W÷T =68.84×(ΔA+0.0054)
T:反應(yīng)時(shí)間,1h=1/24d; V反總:反應(yīng)體系總體積:9.25×10-4 L;W:樣本質(zhì)量,0.05g。
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