當(dāng)前位置： 首頁(yè) - 產(chǎn)品目錄 - 生化試劑盒
土壤酸性轉(zhuǎn)化酶（S-AI）檢測(cè)試劑盒（微量法 100T/48S）
| 貨號(hào) | SH0333 | 售價(jià)（元） | 1260 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
|
貨號(hào) |
名稱(chēng) |
規(guī)格 |
|
SH0333 |
土壤酸性轉(zhuǎn)化酶（S-AI）檢測(cè)試劑盒（微量法 100T/48S） |
100管/48樣 |
正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
S-AI在pH 為4.5~5.0（酸性）條件下催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖，是土壤微生物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。
測(cè)定原理：
S-AI催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖，進(jìn)一步與3,5－二硝基水楊酸反應(yīng)，生成棕紅色氨基化合物，在510nm有特征光吸收，在一定范圍內(nèi)510nm光吸收增加速率與AI活性成正比。
試劑組成和配制：
|
產(chǎn)品名稱(chēng) |
SH0333-100T/48S |
Storage |
|
試劑一：液體 |
50ml |
4℃ |
|
試劑二：粉劑 |
1瓶 |
4℃ |
|
試劑三：液體 |
10ml |
4℃ |
|
說(shuō)明書(shū) |
一份 |
|
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入25ml試劑一充分溶解備用；用不完的試劑4℃保存。
自備儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
樣品處理：
新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干，過(guò)30~50目篩。
測(cè)定步驟和加樣表：
|
試劑名稱(chēng)（μl） |
測(cè)定管 |
對(duì)照管 |
|
風(fēng)干土樣（g） |
0.05 |
0.05 |
|
試劑一 |
|
400 |
|
試劑二 |
400 |
|
混勻， 37℃準(zhǔn)確水浴30min后，95℃水浴10min（蓋緊，以防水分散失），流水冷卻后
充分混勻（以保證濃度不變），10000g 25℃離心10min，取上清液；
|
上清液 |
200 |
200 |
|
試劑三 |
100 |
100 |
混勻，95℃水浴10min（蓋緊，以防止水分散失），流水冷卻后充分混勻， 510nm處，記錄各管吸光值A，如果吸光值大于2，可以用蒸餾水稀釋后測(cè)定(計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù))，ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照。
S-AI活性計(jì)算：
a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.0016x -0.001；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μg/ml），y為吸光值。
單位的定義：每天每g土樣中產(chǎn)生1mg還原糖定義為一個(gè)S-AI活力單位。
S-AI活力（mg/d /g土樣）＝[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V反總÷W÷T ÷1000=240×(ΔA+0.001)
V反總：反應(yīng)體系總體積：0.4ml；T：反應(yīng)時(shí)間，1/48d； W：樣本質(zhì)量，0.05g；1mg=1000μg。
b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.0008x -0.001；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μg/ml），y為吸光值。
單位的定義：每天每g土樣中產(chǎn)生1mg還原糖定義為一個(gè)S-AI活力單位。
S-AI活力（mg/d/g土樣）＝[(ΔA +0.001) ÷0.0008×V反總÷W÷T ÷1000=480×(ΔA+0.001)
V反總：反應(yīng)體系總體積：0.4ml；T：反應(yīng)時(shí)間，1/48d； W：樣本質(zhì)量，0.05g；1mg=1000μg。