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土壤堿性蛋白酶檢測試劑盒(分光光度法 50T/24S)

貨號 SH0329 售價(元) 840
規(guī)格 50T/24S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0329

 土壤堿性蛋白酶(Solid - Alcalase Protease,S-ALPT)試劑盒(分光光度法 50T/24S)

50管/24樣

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機化合物的轉(zhuǎn)化,其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。S-ALPT在堿性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解,與土壤有機質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。

測定原理:

堿性條件下,S-ALPT可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍;在680nm有特征吸收峰。

試劑組成和配置:

產(chǎn)品名稱

SH0329-50T/24S

Storage

試劑一:液體

20ml

4℃

試劑二:粉劑

1

4℃

試劑三:粉劑

1

4℃

試劑:粉劑

1

4℃

試劑五:液體

10ml

4℃

試劑:液體

1.5ml

4℃

試劑:液體

5ml

4℃

說明書

一份

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入6ml蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑4℃保存;

試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入2ml試劑七,沸水浴加熱溶解,然后加入8ml;

試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入40ml蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑4℃保存;

試劑六:液體1.5ml×1支,0.05mg/ml標準酪氨酸溶液;4℃保存。

自備儀器和用品:

可見分光光度計、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、蒸餾水。

樣品處理:

新鮮土樣自然風干或37度烘箱風干,過30~50目篩。

測定步驟:

1、分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至680nm,蒸餾水調(diào)零。

2、試劑二、三和四40℃水浴10min。

3、樣本測定。

試劑名稱

測定管

對照管

風干土樣(g

0.04

0.04

試劑一(μl

 

300

試劑三(μl

300

 

混勻后,40℃水浴30min,振蕩5-6次,使土樣與反應(yīng)液充分接觸

試劑二(μl

100

100

混勻,8000g 25℃離心10min,取上清液,在EP管中加入下列試劑

 

測定管

對照管

標準管

上清液(μl

150

150

 

試劑六(μl

 

 

150

試劑四(μl

700

700

700

試劑五(μl

150

150

150

混勻,40℃水浴20min,8000g 25℃離心10min,取上清液,680nm下讀取各管吸光值A

注意事項

標準管只需測一次。每個測定管設(shè)一個對照管。

S-ALPT活性計算:

單位定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1mg酪氨酸為一個 S-ALPT活力單位。

S-ALPT(mg/d/g土樣)=C標準×(A測定管-A對照管)÷A標準管×V反總÷W÷T=24×(A測定管-A對照管)÷A標準管

C標準管:標準管濃度,0.05mg/ml;V反總:反應(yīng)體系總體積,0.4ml;T:反應(yīng)時間,30min=1/48d; W:樣本質(zhì)量,0.04g。