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土壤酸性蛋白酶檢測試劑盒（微量法 100T/48S）
| 貨號 | SH0325 | 售價（元） | 1500 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0325 |
土壤酸性蛋白酶（Solid -Acid Protease，S-ACPT）試劑盒（微量法 100T/48S） |
100管/48樣 |
測定意義：
土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機化合物的轉(zhuǎn)化，其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。S-ACPT在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解，與土壤有機質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。
測定原理：
酸性條件下，S-ACPT可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸；在堿性條件下，酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍；在680nm有特征吸收峰。
試劑組成和配置：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0325-100T/48S |
Storage |
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試劑一：液體一 |
1ml |
4℃ |
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試劑一：液體二 |
0.5ml |
4℃ |
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試劑二：粉劑 |
1瓶 |
4℃ |
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試劑三：粉劑 |
1瓶 |
4℃ |
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試劑四：粉劑 |
1瓶 |
4℃ |
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試劑五：液體 |
8ml |
4℃ |
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試劑六：液體 |
1.5ml |
4℃ |
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試劑七：液體 |
5ml |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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試劑一的配制：臨用前按液體一：液體二：蒸餾水=140（μl）：20（μl）：21（ml）的比例配制，現(xiàn)配現(xiàn)用，如出現(xiàn)白色絮狀沉淀則不能用。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入6ml蒸餾水充分溶解；用不完的試劑4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入2ml試劑七，沸水浴加熱溶解，然后加入8ml；
試劑四：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入30ml蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑4℃保存；
試劑六：液體1.5ml×1支，0.05mg/ml標(biāo)準(zhǔn)酪氨酸溶液，4℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、雙蒸水。
樣品處理：
新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干，過30~50目篩。
測定步驟：
1、試劑一的配制：見試劑的組成和配制。
2、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至680nm，蒸餾水調(diào)零。
3、樣本測定：
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試劑名稱 |
測定管 |
對照管 |
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風(fēng)干土樣（g） |
0.02 |
0.02 |
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試劑一（μl） |
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150 |
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試劑三（μl） |
150 |
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混勻，40℃水浴30min，振蕩5-6次，使土樣與反應(yīng)液充分接觸 |
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試劑二（μl） |
50 |
50 |
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混勻，8000g25℃離心10min，取上清液，在EP管或96孔板中加入下列試劑 |
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測定管 |
對照管 |
標(biāo)準(zhǔn)管 |
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上清液（μl） |
60 |
60 |
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試劑六（μl） |
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60 |
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試劑四（μl） |
280 |
280 |
280 |
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試劑五（μl） |
60 |
60 |
60 |
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混勻，40℃水浴20min，8000g 25℃離心10min，取上清液200μl，680nm下讀取各管吸光值A
注意事項
標(biāo)準(zhǔn)管只需測一次。每個測定管設(shè)一個對照管。
S-ACPT活性計算：
單位定義：每天每g土樣中產(chǎn)生1mg酪氨酸為一個 S-ACPT活力單位。
S-ACPT(mg/d/g土樣)=C標(biāo)準(zhǔn)×(A測定管-A對照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管×V反總÷W÷T=24×(A測定管-A對照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管
C標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，0.05mg/ml；V反總：反應(yīng)體系總體積，0.2ml；T：反應(yīng)時間，30min=1/48d； W：樣本質(zhì)量，0.02g。