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土壤纖維素酶(S-CL)檢測試劑盒(微量法100T/48S)

貨號(hào) SH0321 售價(jià)(元) 1344
規(guī)格 100T/48S CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

SH0321

土壤纖維素酶(S-CL)檢測試劑盒(微量法100T/48S)

100管/48樣

正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

S-CL主要來源于土壤微生物,S-CL催化農(nóng)作物秸稈產(chǎn)生的葡萄糖是主要的碳源營養(yǎng)物質(zhì)。

測定原理:

采用蒽酮比色法測定S-CL催化纖維素降解產(chǎn)生的還原糖的含量。

試劑的組成和配制:

產(chǎn)品名稱

SH0321-100T/48S

Storage

試劑一:甲苯

10ml(自備)

4℃

試劑二:液體

6ml

4℃

試劑三:液體

40ml

4℃

試劑:粉劑

1

4℃

說明書

一份

試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存; 臨用前加入5ml蒸餾水和45ml濃硫酸充分溶解待用。

自備儀器和用品:

酶標(biāo)儀/可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板/微量石英比色皿、甲苯、硫酸(不允許快遞)和蒸餾水。

樣品處理:

新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。

加樣表和測定步驟:

1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至570nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 加樣表(1.5ml棕色EP管中按下表依次加樣):

 

對照管

測定管

風(fēng)干土樣(g

0.05

0.05

試劑一 (μl)

50

50

振蕩混勻15min

試劑二(μl

 

90

試劑三(μl

370

370

蒸餾水(μl

180

90

37℃振蕩反應(yīng)3h后,90℃水浴15min(蓋緊,防止水分散失),冷卻后

8000g 25℃離心10min,取上清,得糖化液

糖化液 (μl)

140

140

試劑四 (μl)

260

260

混勻, 90℃水浴10min(蓋緊,防止水分散失),冷卻,取200μl至微量石英比色皿或96孔板中,測620nm下吸光值A,計(jì)算ΔA=A測定管-A對照管。每個(gè)測定管設(shè)一個(gè)對照管。

S-CL活力計(jì)算

a.用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 5.018x - 0.0462;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml),y為吸光值。

單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1mg 葡萄糖定義為一個(gè)酶活力單位。

S-CL活力(mg/d/g)=(ΔA+0.0462) ÷5.018×V反總÷W÷T =19.1×(ΔA+0.0462)

T:反應(yīng)時(shí)間,3h=1/8d; V反總:反應(yīng)體系總體積:0.6ml;W:樣本質(zhì)量,0.05g

b.96孔板測定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 2.5090x - 0.0462;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml),y為吸光值。

單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1mg 葡萄糖定義為一個(gè)酶活力單位。

S-CL活力(mg/d/g)=(ΔA+0.0462) ÷2.5090×V反總÷W÷T =38.3×(ΔA+0.0462)

T:反應(yīng)時(shí)間,3h=1/8d; V反總:反應(yīng)體系總體積:0.6ml;W:樣本質(zhì)量,0.05g。