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土壤纖維素酶(S-CL)檢測試劑盒(微量法100T/48S)
貨號(hào) | SH0321 | 售價(jià)(元) | 1344 |
規(guī)格 | 100T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
SH0321 |
土壤纖維素酶(S-CL)檢測試劑盒(微量法100T/48S) |
100管/48樣 |
測定意義:
S-CL主要來源于土壤微生物,S-CL催化農(nóng)作物秸稈產(chǎn)生的葡萄糖是主要的碳源營養(yǎng)物質(zhì)。
測定原理:
采用蒽酮比色法測定S-CL催化纖維素降解產(chǎn)生的還原糖的含量。
試劑的組成和配制:
產(chǎn)品名稱 |
SH0321-100T/48S |
Storage |
試劑一:甲苯 |
10ml(自備) |
4℃ |
試劑二:液體 |
6ml |
4℃ |
試劑三:液體 |
40ml |
4℃ |
試劑四:粉劑 |
1瓶 |
4℃ |
說明書 |
一份 |
試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存; 臨用前加入5ml蒸餾水和45ml濃硫酸充分溶解待用。
自備儀器和用品:
酶標(biāo)儀/可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板/微量石英比色皿、甲苯、硫酸(不允許快遞)和蒸餾水。
樣品處理:
新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。
加樣表和測定步驟:
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至570nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 加樣表(在1.5ml棕色EP管中按下表依次加樣):
|
對照管 |
測定管 |
風(fēng)干土樣(g) |
0.05 |
0.05 |
試劑一 (μl) |
50 |
50 |
振蕩混勻15min |
||
試劑二(μl ) |
|
90 |
試劑三(μl ) |
370 |
370 |
蒸餾水(μl ) |
180 |
90 |
37℃振蕩反應(yīng)3h后,90℃水浴15min(蓋緊,防止水分散失),冷卻后
8000g 25℃離心10min,取上清,得糖化液
糖化液 (μl) |
140 |
140 |
試劑四 (μl) |
260 |
260 |
混勻, 90℃水浴10min(蓋緊,防止水分散失),冷卻,取200μl至微量石英比色皿或96孔板中,測620nm下吸光值A,計(jì)算ΔA=A測定管-A對照管。每個(gè)測定管設(shè)一個(gè)對照管。
S-CL活力計(jì)算:
a.用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 5.018x - 0.0462;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml),y為吸光值。
單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1mg 葡萄糖定義為一個(gè)酶活力單位。
S-CL活力(mg/d/g)=(ΔA+0.0462) ÷5.018×V反總÷W÷T =19.1×(ΔA+0.0462)
T:反應(yīng)時(shí)間,3h=1/8d; V反總:反應(yīng)體系總體積:0.6ml;W:樣本質(zhì)量,0.05g。
b.用96孔板測定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 2.5090x - 0.0462;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml),y為吸光值。
單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1mg 葡萄糖定義為一個(gè)酶活力單位。
S-CL活力(mg/d/g)=(ΔA+0.0462) ÷2.5090×V反總÷W÷T =38.3×(ΔA+0.0462)
T:反應(yīng)時(shí)間,3h=1/8d; V反總:反應(yīng)體系總體積:0.6ml;W:樣本質(zhì)量,0.05g。