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土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)檢測(cè)試劑盒(微量法100T/48S)
貨號(hào) | SH0319 | 售價(jià)(元) | 1344 |
規(guī)格 | 100T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
SH0319 |
土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)檢測(cè)試劑盒(微量法100T/48S) |
100管/48樣 |
測(cè)定意義:
S-β-GC能夠催化水解芳基或烴基與糖基原子團(tuán)之間的糖苷鍵生成葡萄糖,是纖維素分解酶系中重要組成成分之一,在土壤微生物的糖類代謝方面具有重要生理功能。
測(cè)定原理:
S-β-GC能夠催化對(duì)-硝基苯-β-D吡喃葡萄糖苷生成對(duì)-硝基苯酚,后者在400nm有特征光吸收。
試劑組成和配制:
產(chǎn)品名稱 |
SH0319-100T/48S |
Storage |
試劑一:甲苯 |
5ml(自備) |
4℃ |
試劑二:粉劑 |
1瓶 |
-20℃ |
試劑三:液體 |
20ml |
4℃ |
試劑四:液體 |
15ml |
4℃ |
說(shuō)明書(shū) |
一份 |
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入10ml蒸餾水,充分溶解備用,用不完的試劑仍-20℃保存。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
樣品處理:
新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干,過(guò)30~50目篩。
測(cè)定步驟:
1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至400nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 加樣表。
試劑名稱 |
測(cè)定管 |
對(duì)照管 |
風(fēng)干土樣(g) |
0.02 |
0.02 |
試劑一(μl) |
10 |
10 |
|
室溫振蕩混勻15min |
90℃振蕩混勻15min |
試劑二(μl) |
130 |
|
蒸餾水 |
|
130 |
試劑三(μl) |
160 |
160 |
混勻, 37℃振蕩反應(yīng)1h后,90℃水浴5min(蓋緊,防止水分散失),流水冷卻,
10000g 25℃離心10min,取上清液(在EP管或96孔板中加入下列試劑)
上清液(μl) |
70 |
70 |
試劑四(μl) |
130 |
130 |
充分混勻,室溫靜置2min后, 400nm處測(cè)定吸光值A,計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
S-β-GC活力計(jì)算:
a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.0032x -0.0027;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μmol/L),y為吸光值。
單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1 μmol對(duì)-硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。
S-β-GC活力(μmol/d/g 土樣)= (ΔA+0.0027) ÷0.0032×V反總÷W÷T =112.5×(ΔA+0.0027)
T:反應(yīng)時(shí)間,1h=1/24d; V反總:反應(yīng)體系總體積:3×10-4 L;W:樣本質(zhì)量,0.02g。
b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.0016x -0.0027;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μmol/L),y為吸光值。
單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1 μmol對(duì)-硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。
S-β-GC活力(μmol/d/g 土樣)= (ΔA+0.0027) ÷0.0016×V反總÷W÷T =225×(ΔA+0.0027)
T:反應(yīng)時(shí)間,1h=1/24d; V反總:反應(yīng)體系總體積:3×10-4 L;W:樣本質(zhì)量,0.02g。
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