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土壤脲酶(S-UE)檢測試劑盒(微量法 100T/48S)

貨號 SH0313 售價(元) 936
規(guī)格 100T/48S CAS號
  • 產品簡介
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貨號

名稱

規(guī)格

SH0313

土壤脲酶(S-UE)檢測試劑盒(微量法 100T/48S)

100管/48樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義:

S-UE能夠水解尿素,產生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數量、有機物質含量、全氮和速效氮含量呈正相關。土壤脲酶活性反應了土壤的氮素狀況。

測定原理:

利用靛酚藍比色法測定脲酶水解尿素產生的NH3-N。

試劑的組成和配制:

產品名稱

SH0313-100T/48S

Storage

試劑一:甲苯

2ml(自備)

4℃

試劑二:粉劑

1

-4℃

試劑三:液體

22ml

4℃

試劑A

1

4℃

試劑B

1

4℃

試劑五:液體

2ml

4℃

說明書

一份

 

試劑二:粉劑×1瓶,臨用前加入9ml蒸餾水,充分溶解待用,4℃保存;用不完的試劑4℃保存;

試劑四A液:液體×1支,4℃保存;試劑四B液:液體×1瓶,4℃保存;臨用前將A液倒入B液中混合,待用;用不完的試劑4℃保存一周。

自備儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。

樣品處理:

新鮮土樣自然風干或37度烘箱風干,過30~50目篩。

測定步驟:

1 、培養(yǎng)

 

測定管

對照管

風干土樣(g)

0.05

0.05

試劑一(μl

20

20

振蕩混勻,室溫放置15min

試劑二(μl

90

 

蒸餾水(μl

 

90

試劑三(μl

190

190

混勻,放入37℃水浴培養(yǎng)24h后,10000g 25℃離心10min,取上清液。

2、將培養(yǎng)結束的上清液稀釋10倍(取0.1ml上清液,加入0.9ml蒸餾水)。

3、測氨量(在微量石英比色皿或96孔板中加入下列試劑):

 

測定管

對照管

稀釋后的上清液(μl

80

80

試劑四(μl

15

15

試劑五(μl

15

15

充分混勻,室溫放置20min

蒸餾水(μl

90

90

混勻,于578nm處,蒸餾水調零,讀吸光值A,計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管設一個對照管。

脲酶活力計算

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為y = 0.0915x +0.0373;x為標準品濃度(μg/ml),y為吸光值A。

單位的定義:每天每g土樣中產生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。

脲酶活力(μg/d/g 土樣)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V反總÷W÷T =656×(ΔA -0.0373)

10:稀釋倍數;T:反應時間,1d; V反總:反應體系總體積:0.3ml;W:樣本質量,0.05g

b.96孔板測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為y = 0.04575x +0.0373;x為標準品濃度(μg/ml),y為吸光值A。

單位的定義:每天每g土樣中產生1μg NH3-N定義為一個酶活力單位。

脲酶活力(μg/d /g 土樣)=(ΔA-0.0373) ÷0.04575×10×V反總÷W÷T =1312×(ΔA -0.0373)

10:稀釋倍數;T:反應時間,1d; V反總:反應體系總體積:0.3ml;W:樣本質量,0.05g。