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淀粉分支酶檢測試劑盒(分光光度 50T/24S)

貨號 SH0279 售價(元) 1056
規(guī)格 50T/24S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0279

淀粉分支酶(Starch branching enzyme,SBE)試劑盒(分光光度 50T/24S)

50管/24樣

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

SBEEC 2.4.1.18)主要存在于植物中,是參與支鏈淀粉合成的關(guān)鍵酶,測定SBE活性在淀粉生物合成、優(yōu)質(zhì)農(nóng)作物品種選育和品質(zhì)遺傳改良研究中具有重要意義。

測定原理:

直鏈淀粉和碘結(jié)合后在660nm有特征光吸收,SBE使直鏈淀粉含量減少,從而降低了淀粉-碘復(fù)合物在660nm吸收值,一定時間內(nèi)吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0279-50T/24S

Storage

提取液液體

60ml

4

試劑一:液體

20ml

4

試劑二:粉劑

2

4

試劑:液體

25ml

4

試劑:液體

5ml

4

說明書

1

 

試劑二臨用前每支加入1ml蒸餾水,95℃沸水浴充分溶解后備用;用不完的試劑4℃保存;

 

自備儀器和用品:

可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水

粗酶液制備:

按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。15000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟

試劑名稱(μl

對照管

測定管

95℃水浴1min后滅粗酶液

250

 

粗酶液

 

250

試劑一

320

320

試劑二

30

30

混勻,37℃準(zhǔn)確保溫20 min,95℃水浴5min(蓋緊防止水分散失),冷卻

試劑三

500

500

試劑四

40

40

混勻,室溫靜置10min,用蒸餾水調(diào)零,660nm處讀取各管吸光值。

注意:

1、可以在不同對照管中加入不同樣品的粗酶液,然后集中進(jìn)行5min 95℃水浴處理。

2、試劑二如有沉淀,務(wù)必沸水浴溶解后使用。

SBE活力單位的計算:

1、按照蛋白濃度計算

單位的定義:以波長660nm的吸光度下降百分率表示,每mg蛋白在反應(yīng)體系中每降低1%碘藍(lán)值為一個酶活性單位。

SBE活性(U/mg prot)=( A對照管-A測定管)/A對照管÷Cpr ×100

2、按照樣本鮮重計算

單位的定義:以波長660nm的吸光度下降百分率表示,每g組織在反應(yīng)體系中每降低1%碘藍(lán)值為一個酶活性單位。

SBE活性(U/g 鮮重)=(A對照管-A測定管)/A對照管÷(W÷V樣總)×100

V樣總:提取液總體積,1ml;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣品質(zhì)量,g