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淀粉分支酶檢測試劑盒(分光光度 50T/24S)
貨號 | SH0279 | 售價(元) | 1056 |
規(guī)格 | 50T/24S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
SH0279 |
淀粉分支酶(Starch branching enzyme,SBE)試劑盒(分光光度 50T/24S) |
50管/24樣 |
測定意義:
SBE(EC 2.4.1.18)主要存在于植物中,是參與支鏈淀粉合成的關(guān)鍵酶,測定SBE活性在淀粉生物合成、優(yōu)質(zhì)農(nóng)作物品種選育和品質(zhì)遺傳改良研究中具有重要意義。
測定原理:
直鏈淀粉和碘結(jié)合后在660nm有特征光吸收,SBE使直鏈淀粉含量減少,從而降低了淀粉-碘復(fù)合物在660nm吸收值,一定時間內(nèi)吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。
組成:
產(chǎn)品名稱 |
SH0279-50T/24S |
Storage |
提取液:液體 |
60ml |
4℃ |
試劑一:液體 |
20ml |
4℃ |
試劑二:粉劑 |
2支 |
4℃ |
試劑三:液體 |
25ml |
4℃ |
試劑四:液體 |
5ml |
4℃ |
說明書 |
1份 |
試劑二臨用前每支加入1ml蒸餾水,95℃沸水浴充分溶解后備用;用不完的試劑4℃保存;
自備儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水
粗酶液制備:
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。15000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
測定步驟:
試劑名稱(μl) |
對照管 |
測定管 |
95℃水浴1min后滅活的粗酶液 |
250 |
|
粗酶液 |
|
250 |
試劑一 |
320 |
320 |
試劑二 |
30 |
30 |
混勻,37℃準(zhǔn)確保溫20 min,95℃水浴5min(蓋緊防止水分散失),冷卻
試劑三 |
500 |
500 |
試劑四 |
40 |
40 |
混勻,室溫靜置10min,用蒸餾水調(diào)零,660nm處讀取各管吸光值。
注意:
1、可以在不同對照管中加入不同樣品的粗酶液,然后集中進(jìn)行5min 95℃水浴處理。
2、試劑二如有沉淀,務(wù)必沸水浴溶解后使用。
SBE活力單位的計算:
1、按照蛋白濃度計算
單位的定義:以波長660nm的吸光度下降百分率表示,每mg蛋白在反應(yīng)體系中每降低1%碘藍(lán)值為一個酶活性單位。
SBE活性(U/mg prot)=( A對照管-A測定管)/A對照管÷Cpr ×100
2、按照樣本鮮重計算
單位的定義:以波長660nm的吸光度下降百分率表示,每g組織在反應(yīng)體系中每降低1%碘藍(lán)值為一個酶活性單位。
SBE活性(U/g 鮮重)=(A對照管-A測定管)/A對照管÷(W÷V樣總)×100
V樣總:提取液總體積,1ml;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣品質(zhì)量,g。