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總糖檢測試劑盒(微量法 100T/96S)
貨號 | SH0193 | 售價(元) | 696 |
規(guī)格 | 100T/96S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
SH0193 |
總糖檢測試劑盒(微量法 100T/96S) |
100管/96樣 |
測定意義:
糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一,也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)??偺且部煞Q為碳水化合物,包括可溶性的單糖,二糖以及不溶性的淀粉,纖維素,幾丁質(zhì)等。
測定原理:
總糖酸水解為還原糖,在NaOH和丙三醇存在下,DNS試劑與還原糖共熱后被還原成氨基化合物,在過量的NaOH堿性溶液中呈桔紅色,在540nm處有最大吸收峰,以此測定樣品中的總糖含量。
組成:
產(chǎn)品名稱 |
SH0193-100T/96S |
Storage |
試劑一:液體 |
100ml |
4℃ |
試劑二:液體 |
100ml |
4℃ |
試劑三:液體 |
5ml |
4℃避光 |
說明書 |
一份 |
自備儀器和用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、沸水浴、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水。
樣品中總糖的提?。?/span>
組織:稱取約0.1g樣品,加入1ml 試劑一,1.5ml蒸餾水,勻漿,95℃水浴中加熱30min,加入1ml試劑二,混勻,用蒸餾水定容至10ml,8000g 25℃離心10min,取上清液待測。(注意稀釋,見注意事項)
液體樣本:取0.1ml樣本,加入1ml 試劑一,1.5ml蒸餾水,勻漿,95℃水浴中加熱30min,加入1ml試劑二,8000g 25℃離心10min,取上清液待測。(注意稀釋,見注意事項)
測定步驟:
1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至540nm,蒸餾水調(diào)零。
2、調(diào)節(jié)水浴鍋至95度。
3、加樣表:
試劑(μl) |
空白管 |
測定管 |
樣本 |
|
8 |
蒸餾水 |
16 |
8 |
試劑三 |
12 |
12 |
混勻,置95度水浴中10min(蓋緊,以防止水分散失),冷卻至室溫
蒸餾水 |
172 |
172 |
混勻,540nm測定吸光值,ΔA=A測定管-A空白管
注意:1、空白管只要做一管。
2、如果ΔA大于2,需要將上清液用蒸餾水稀釋,計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
總糖含量計算:
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 0.3002x - 0.0507;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml),y為吸光值。
2、按樣本鮮重計算:
總糖(mg /g鮮重)= [(ΔA+0.0507) ÷0.3002×V1]÷(W×V1÷V2)×稀釋倍數(shù)=33.311×(ΔA+0.0507) ÷W×稀釋倍數(shù)。
3、按樣本蛋白濃度計算:
總糖(mg /mg prot)=[(ΔA+0.0507) ÷0.3002×V1]÷(V1×Cpr) ×稀釋倍數(shù)=3.3311×(ΔA+0.0507) ÷Cpr×稀釋倍數(shù)。
V1:加入樣本體積,0.008ml;V2:加入提取液體積,10ml; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本鮮重,g。
4、按照液體體積計算:
總糖(mg /ml)=[(ΔA+0.0507) ÷0.3002×V1]÷(V3×V1÷V2)×稀釋倍數(shù)=116.59×(ΔA+0.0507)×稀釋倍數(shù)。
V1:加入樣本體積,0.008ml;V2:加入提取液體積,10ml/3.5ml; V3:液體樣本,0.1ml;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本鮮重,g。
注意:最低檢測限為1mg/g鮮重或10ng/mg prot