β－葡萄糖醛酸苷酶（β-GD）檢測試劑盒（微量法 100T/96S）

貨號	SH0189	售價（元）	1176
規(guī)格	100T/96S	CAS號

貨號	名稱	規(guī)格
SH0189	β－葡萄糖醛酸苷酶（β-GD）檢測試劑盒（微量法 100T/96S）	100管/96樣

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義：

β-GD廣泛存在于動物組織中，是一種參與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移過程的基質(zhì)降解酶，具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。該酶在肝細胞中含量較高。此外在胃癌組織中含量豐富，測定胃液β-GD活性對于研究胃癌具有重要的意義。

測定原理：

β-GD催化苯酚 β-D-葡萄糖醛酸產(chǎn)生游離的酚酞，通過測定苯酚含量反應(yīng)該酶活性高低。

組成：

試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入2ml蒸餾水，充分溶解待用；用不完的試劑仍-20℃保存；

試劑四：1μmol/ml標準儲備液10ml，4℃保存；

自備儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

樣品測定的前處理：

按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

測定步驟：

1、分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至540nm，蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測定

混勻后，37℃反應(yīng)30min

試劑三

150

混勻， 540nm下測定各管吸光值

注意：標準管和空白管只需測一次。

β-GD活性計算：

（1）按樣本鮮重計算：

單位定義：每小時每g鮮重樣品中催化產(chǎn)生 1μmol酚酞的量為一個活力單位。

β-GD（μmol/h/g 鮮重）= (C標準管×V1)×（A測定管-A空白管）÷（A標準管-A空白管）÷(W×V1÷V2)÷T=2×（A測定管-A空白管）÷（A標準管-A空白管）÷W

（2）按樣本蛋白濃度計算：

單位定義：每小時每mg組織蛋白催化產(chǎn)生 1μmol酚酞的量為一個活力單位。

β-GD（μmol/h/mg prot）= (C標準管×V1)×（A測定管-A空白管）÷（A標準管-A空白管）÷(V1×Cpr)÷T=2×（A測定管-A空白管）÷（A標準管-A空白管）÷Cpr

C標準管：標準管濃度， 1μmol/ml；V1：加入樣本體積：0.01ml；V2：加入提取液體積，1ml；T：反應(yīng)時間，0.5h；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本鮮重，g。

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