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多功能氧化酶（MFO）檢測試劑盒（分光光度法 50T/48S）
| 貨號 | SH0079 | 售價（元） | 1320 |
| 規(guī)格 | 50T/48S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0079 |
多功能氧化酶（MFO）檢測試劑盒（分光光度法 50T/48S） |
50管/48樣 |
正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
多功能氧化酶又稱混合功能氧化酶，可產(chǎn)生降解反應(yīng)，可使原化學(xué)物質(zhì)變?yōu)榈投镜幕驘o毒的物質(zhì)從體內(nèi)排出；還可產(chǎn)生激活反應(yīng)，可使原化學(xué)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為具有親電子性質(zhì)，導(dǎo)致毒性增強，成為致突變物或終致癌物。近年來對混合功能氧化酶系與外源性化學(xué)物質(zhì)相互作用的深入研究，對于從分子生物學(xué)水平上進(jìn)一步了解外源性化學(xué)物質(zhì)的毒作用具有重要意義。
測定原理：
MFO催化對硝基苯甲醚產(chǎn)生對硝基苯酚，在400nm下有特征吸光值。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0079-50T/48S |
Storage |
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提取液：液體 |
100ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
30ml |
4℃避光 |
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試劑二：粉劑 |
3管 |
4℃ |
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試劑三：液體 |
30ml |
4℃ |
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試劑四：液體 |
80ml |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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試劑二：粉劑×3管，-20℃保存；臨用前取一管加入2ml水溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用。
自備儀器和用品：
分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水、氯仿。
粗酶液提?。?/span>
按照組織質(zhì)量（g）：提取液（ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。12000g 4℃離心20min，取上清，置冰上待測。
測定步驟：
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至400nm，蒸餾水調(diào)零。
2、在10ml管中依次加入如下試劑
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試劑名稱（μl） |
測定 |
空白 |
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試劑一 |
500 |
500 |
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試劑二 |
100 |
100 |
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提取液 |
400 |
900 |
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樣本 |
500 |
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混勻，37℃水浴30min |
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試劑三 |
500 |
500 |
分別加入2.5ml氯仿，充分混勻萃取，靜置10min，取下層氯仿層1.5ml至新的管中。再加入試劑四1.5ml，充分混勻萃取，取上層水相1ml于1ml玻璃比色皿中，400nm下測定吸光值A測定與A空白，△A=A測定-A空白。空白管只需測一管。
MFO活性計算:
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.0238x + 0.0021，R2 = 0.9997；y，吸光度；x,標(biāo)準(zhǔn)品濃度，單位nmol/ml。
（1）按樣本質(zhì)量計算
單位定義：每g樣本每分鐘產(chǎn)生1nmol對硝基苯酚定義為一個酶活力單位。
MFO（nmol/min/g 鮮重）=（△A-0.0021）÷0.0238×V總÷(V樣÷V樣總×W)÷T
=4.2×（△A-0.0021）÷W
（2）按樣本蛋白濃度計算
單位定義：每mg組織蛋白每分鐘產(chǎn)生1nmol對硝基苯酚定義為一個酶活力單位。
MFO（nmol/min/mg prot）=（△A-0.0021）÷0.0238×V總÷(V樣×Cpr)÷T
=4.2×（△A-0.0021）÷Cpr
V總：最終萃取液體積，1.5 ml；V樣：反應(yīng)中樣品體積，500μl；T：反應(yīng)時間，30min；W：樣品質(zhì)量，g；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml。