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查爾酮異構(gòu)酶（CHI）檢測試劑盒(分光光度法50T/48S)
| 貨號 | SH0073 | 售價（元） | 1920 |
| 規(guī)格 | 50T/48S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0073 |
查爾酮異構(gòu)酶（CHI）檢測試劑盒(分光光度法50T/48S) |
50管/48樣 |
正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
查爾酮異構(gòu)酶(Chalcone isomerase, CHI)是第一個被認(rèn)識的黃酮類化合物合成相關(guān)酶，也是黃酮代謝途徑中的關(guān)鍵酶之一。查爾酮異構(gòu)酶和查爾酮合酶一起構(gòu)成了黃酮類化合物生物合成的限速酶。
測定原理：
查爾酮異構(gòu)酶（CHI）催化查爾酮環(huán)化形成 4,5,7-三羥基黃烷酮，通過測定381nm下的吸光度變化表示CHI的活性。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0073-50T/48S |
Storage |
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提取液：液體 |
60ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
60ml |
4℃ |
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試劑二：粉劑 |
1瓶 |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存；用時加入50ml試劑一充分溶解待用；用不完的試劑4℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水
粗酶液提取：
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
測定操作表:
1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至381nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 樣本測定表
在1ml玻璃比色皿中加入50μl上清和950μl試劑二，立即混勻并記錄381nm下初始吸光值A1和37℃保溫30min后的吸光值A2。計(jì)算ΔA＝A2-A1。
CHI活性計(jì)算：
(1) 按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位定義：每mg組織蛋白在每ml反應(yīng)體系中每小時A381變化0.1為一個酶活力單位。
CHI（U/mg prot）＝ΔA×V反總÷（V樣×Cpr）÷0.1÷T =400×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算
單位定義：每g組織在每ml反應(yīng)體系中每小時A381變化0.1為一個酶活力單位。
CHI（U/g 鮮重）＝ΔA×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷0.1÷T =400×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，1ml； V樣：加入樣本體積，0.05ml；V樣總：加入提取液體積，1 ml；T：反應(yīng)時間，0.5h；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量。