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非蛋白質(zhì)巰基測(cè)定試劑盒微量法（微量法 100T/96S）
| 貨號(hào) | SH0064 | 售價(jià)（元） | 252 |
| 規(guī)格 | 100T/96S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0064 |
非蛋白質(zhì)巰基測(cè)定試劑盒微量法（微量法 100T/96S） |
100T/96S |
正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
生物體內(nèi)巰基主要包括非蛋白質(zhì)巰基和蛋白質(zhì)巰基。巰基化合物在體內(nèi)具有重要的解毒功能，對(duì)生物體的自我調(diào)節(jié)具有非常重要的生理意義。
測(cè)定原理：
巰基基團(tuán)與5,5’-二硫代-雙-硝基苯甲酸（DTNB）反應(yīng)，生成黃色化合物，在412nm處有最大吸收峰。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0064-100T/96S |
Storage |
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提取液：液體 |
100ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
18ml |
4℃ |
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試劑二：液體 |
1ml |
4℃避光 |
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說明書 |
一份 |
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自備儀器和用品：
天平、研缽、恒溫水浴鍋、酶標(biāo)儀、96孔板、乙醇和蒸餾水。
樣品的制備：
1. 按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2. 血清，培養(yǎng)液：取0.1ml樣本，加入0.4ml提取液，混勻，室溫靜置10min, 然后8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
測(cè)定操作表
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長至412nm。
2、 操作表
在96孔板中加入如下試劑
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對(duì)照管 |
測(cè)定管 |
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樣品（μl） |
40 |
40 |
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試劑一（μl） |
150 |
150 |
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試劑二（μl） |
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10 |
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乙醇（μl） |
10 |
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混勻，25℃靜置10min，測(cè)定412nm吸光值。ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。 |
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計(jì)算公式：
非蛋白巰基標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 1.8111x - 0.0037，R2 = 1，x為標(biāo)品濃度，單位μmol/ml，y為吸光度ΔA。
1. 組織：
（1）按樣本重量計(jì)算
非蛋白巰基含量（μmol/g 鮮重）=（ΔA+0.0037）÷1.8111×V樣總÷W
=0.552×（ΔA+0.0037）÷W
（2）按樣本蛋白濃度計(jì)算
非蛋白巰基含量（μmol/mg prot）=（ΔA+0.0037）÷1.8111×V樣總÷Cpr
=0.552×（ΔA+0.0037）÷Cpr
2. 血清、培養(yǎng)液：
非蛋白巰基含量（μmol/L）=（ΔA+0.0037）÷1.8111×5×103
=2761×（ΔA+0.0037）
V樣總：加入提取液體積，1ml；W：樣品質(zhì)量，g ；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml；5：血清，培養(yǎng)液等液體樣本稀釋倍數(shù)；103 ：1mmol/ L=103μmol/ L
注意事項(xiàng)：
最低檢出限為10μmol/L。