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超氧陰離子清除能力檢測試劑盒(微量法100T/96S)
貨號 | SH0062 | 售價(元) | 1176 |
規(guī)格 | 100T/96S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
SH0062 |
超氧陰離子清除能力檢測試劑盒(微量法100T/96S) |
100T/96S |
正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產(chǎn)生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞,與機(jī)體衰老和病變有很密切的關(guān)系,清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注。
測定原理:
AP-TEMED系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2-與對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負(fù)相關(guān)。
組成:
產(chǎn)品名稱 |
SH0062-100T/96S |
Storage |
提取液:液體 |
100ml |
4℃ |
試劑一:液體 |
1.5ml |
4℃避光 |
試劑二:粉劑 |
1瓶 |
4℃避光 |
試劑三:液體 |
7.5ml |
4℃ |
試劑四:液體 |
7.5ml |
4℃避光 |
試劑五:液體 |
7.5ml |
4℃避光 |
說明書 |
一份 |
自備儀器和用品:
天平、研缽、低溫離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
樣品處理:
組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1ml提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測。
細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測。
培養(yǎng)液或其它液體:直接檢測。
粉劑藥物可配制成相同濃度,比如1mg/ml
測定操作表:
|
對照管 |
測定管 |
試劑一(μl) |
10 |
10 |
試劑二(μl) |
40 |
40 |
H2O(μl) |
25 |
|
充分混勻,25℃反應(yīng)1min |
||
樣品(μl) |
|
25 |
試劑三(μl) |
50 |
50 |
充分混勻,37℃反應(yīng)30min |
||
試劑四(μl) |
50 |
50 |
試劑五(μl) |
50 |
50 |
充分混勻,37℃顯色20min,于微量石英比色皿/96孔板,在530nm處測定對照管和測定管的吸光值,分別記為A對照管和A測定管。 |
注意:對照管只需測定一次。
計算公式:
超氧陰離子清除率 I%=
注意事項:
1. 試劑一4℃可保存2個月,配制好的試劑二4℃可保存一周,建議實驗前配制,并盡快使用。
2. 樣品處理完后立即進(jìn)行測定,或者低溫保存不超過24小時。